人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养
1. 将 15-20cm 长的新生儿脐带放入无菌的 PBS 溶液中储存。(注:4℃下最多贮存 24 小时,室温下不超过 6 小时,否则废弃)2. 用一个钝头的针头扎入脐带静脉管中,用无菌的 PBS 溶液冲洗 3-5 次,将污血冲洗干净为止。3. 用手术钳夹紧脐带下端,加入 15ml 的胶原酶(1mg/ml)室温下消化 15-20分钟,并不时上下摇动脐带。4. 消化完后,将下端手术钳松开,消 ...
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PC12细胞的其他问题
PC12传代的消化丁香园wangpengljr的问题:我最近养PC12细胞做分化方面的研究,但是遇到的难题是PC12细胞本身的贴壁能力就差(养PC12细胞最好是用Gibco的马血清,Hyclone的不贴壁!),最开始没有用胰酶处理,直接吹打下细胞发现成团现象,用0.02%EDTA的PBS吹打似乎不易成团,但是慢慢地细胞贴壁能力下降了,我用poly-Lys包被都不行。我之所以不用胰酶是因为怕胰酶 ...
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细胞培养技术
第一节 培养细胞学 cultural cytology何谓是培养细胞学?指细胞在体外培养的特定条件下,通过对离体细胞的研究,获取的研究结果与细胞生物学具有三个学科相似的信息。细胞生理学:研究细胞生命活动规律,如何从环境中摄取营养,经过代谢获得能量,以促进生长、分裂及其表达功能的。分子细胞学:从遗传信息 (DNA—RNA—蛋白) 角度研究胞内遗传物质的结构和表达的 ...
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肿瘤细胞的原代培养方法
肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,最好在原代培养时能加入生长因子或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。培养方法很多,主要有组织块法、酶消化法、钽网法、脱落细胞法等。
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