关键词: 细胞培养
来源: 丁香园论坛
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zhuoer9401 wrote: 我在养一种细胞,分别用低糖培养液和高糖培养液,然后做RT-PCR,我扩增得这种基因在低糖得时候不能扩增出来,但是在高糖得时候能扩增出来。可能就是在低糖的时候不转录,而在高糖得时候转录。我的发现有没有意义啊?
kiki2009 wrote: 楼主应该确定该基因在低糖培养时是否真的不表达,单靠RT-PCR实验就说明其不表达是不可靠的,有时同一管的cDNA做多管常规PCR,有的有条带,有的没有,意味着人为因素在影响。建议采用其他实验进一步证明其是否真的不表达。 楼主的信息不够详细,该基因在低糖的环境不表达是否有意义或意义有多“大”无法下结论。 既然可以设计确定的引物做RT-PCR,意味着该基因不是新基因,那么可以结合该基因已有的研究,再结合低糖高糖的环境作进一步分析其不表达是否有意义。 个人认为一般细胞,尤其大多数肿瘤细胞,低糖已足够其能量供应了,高糖更有利于细胞贴壁而已,当然对于能量需求特别大的细胞就另当别论了。所以我对楼主目前检测的准确性持怀疑态度。:) 如果真实情况如你所说,期待更详细的资料供我们讨论。 PS:绝对没打击意思,一个有意义的发现也是值得“同道人”高兴的。
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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