关键词: 培养基 氨基酸 高温灭菌
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问:最近在做酵母双杂交,有些营养缺陷培养基要单独加氨基酸,不知道这些氨基酸配成母液以后能不能高温高压灭菌啊?请各位高手指教,谢谢!
答:一般来说,在配制培养基过程中,在高温高压过程中易配破坏的成分如葡萄糖,氨基酸,抗生素等,多采用0.22um的滤膜过滤除菌。所以,建议楼主最好,过滤除菌后单独加入。
问:基酸不能高压灭菌吗??可是在测定蛋白质中氨基酸含量的时候,酸解的条件可是110℃浓盐酸的条件下啊,这个反应里的氨基酸可是可以跑HPLC的,而且氨基酸也基本不存在空间构像问题。我在有些文献中见过氨基酸用121℃灭菌15min的。不知大家有何意见?
答:你的培养基中含有葡萄糖等具有醛基的物质,氨基酸与葡萄糖等在高温下发生麦拉德反应生成羰氨化合物降低了氨基酸的含量,另外这些物质使培养基颜色加深,甚至对微生物产生毒害作用。一般来说将氨基酸过滤除菌,在培养基冷却到五六十度的时候加入即可。
答:请参考国标,可以测定高温后的含量变化,其实就是个验证实验,当然样品必须是单独灭菌的了。Good luck!
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