荧光共振能量转移技术的基本原理和应用
荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)作为一种高效的光学“分子尺”,在生物大分子相互作用、免疫分析、核酸检测等方面有广泛的应用。
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用于石蜡切片的骨相关酶(TRAP、ALP)的双重染色法
1. 前言了解活体的骨代谢状态是研究相关细胞生理活性的一个有效方法。对骨组织进行碱性磷酸酶(ALP)染色后可以了解成骨细胞的骨形成情况,对骨组织进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色可以了解破骨细胞的骨吸收情况。若在同一切片上进行双重染色就能同时了解两者的情况。另外,它有一个优点是在脱钙标本里,只要可以双重染色,无需专用的设备,仅用一般的设备就可以方便地观察到骨代谢。在此前提下,我们需 ...
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激酶 磷酸化酶 磷酸酯酶有什么区别?
激酶(kinase):是能够在ATP和任何一种底物之间起催化作用,转移磷酸基团的一类酶。ATP有三个磷酸基团,其中两个是通过一个高能磷酸键结合,激酶的作用是催化这个高能磷酸键的水解,并利用释放出来的能量,将一个磷酸基团转移到底物分子上。值得一提的是,激酶的活性需要镁离子的存在,因为参与激酶反应需要镁离子和ATP形成Mg—ATP复合物。ATP+底物——&mdas ...
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对硝基苯酚pNPP测脂肪酶酶活
问:我正在做这个试验,买了从C2-C16的不同的对硝基苯酚底物,但是令我困惑的是,C10以下的底物,很容易在缓冲液中自发水解,这样就干扰酶活测定。而大于C10的底物又都很难溶解。很是困惑!请问各位做过这项试验的大虾给予我一定的帮助,不甚感激!答:30毫克的对棕榈酸硝基苯酯(p-NPP)可以溶于10毫升的异丙醇中,稍微水浴加热就可以完全溶解。我是以(p-NPP)为底物,溶液A:30毫克的对棕榈酸硝 ...
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