关键词: emsa 实验技术 实验原理
来源: 互联网
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凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA 结合 蛋白 和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用、DNA定性和定量分析 。生物素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。
如上图所示,DNA-复合物比非结合的探针移动得慢;当检测DNA结合蛋白,可用纯化蛋白、部分纯化蛋白或核细胞 抽提液;竞争实验中采用含蛋白结合序列的dna片段 和寡核苷酸片段(特异)和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA结合蛋白的特异性;在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。
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为什么同一批次提取蛋白跑出的条带不一致
做这个实验的时,我同一批次提取的蛋白,胶跑出的条带都不一致,这是什么原因呢?
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WB 敷牛奶需要的时间
Western Blot 实验时敷牛奶大概多久?一定要过夜吗
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WB发光结果异常
我做WB也不算是新手,自己觉得整个过程也没有什么明显的问题,可是最后发光的时候内参整个是晕开的,分子还连成了一条线,之前没出现过这种情况,所以想请大家帮忙分析下,是胶的问题,蛋白的问题,还是什么别的,谢啦!
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