【共享】酵母电转改进PROTOCOL
小弟弟一次做电转,完全按照毕氏酵母说明书来,居然没长出来。第二次,按老板出国前留下的做,效果甚好!现贡献出来,望对大家有所帮助!小弟刚做酵母表达,在DXY受益匪浅!看到不少关于酵母电转的PROTOCOL,但基本上是按INVITROGEN上的步骤来的。小弟第一次也是照本宣科,可是没出来,后来又按导师留给小弟的PROTOCOL做了一次,转化效果特好。先将其贡献给大家,希望对大家有所帮助:Yeast Transformati ...
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异常血红蛋白(abnormal hemoglobin)筛查
1. 学习血红蛋白电泳分离方法;2. 能辨认正常人和异常血红蛋白的电泳图谱;血红蛋白是一种结合蛋白质,由血红素和珠蛋白组成。正常人所含珠蛋白的多肽链有a、b、d 、e、g和z六种。这六种肽链的基因在人体发育的不同阶段表达状况不一。正常成人红细胞中有三种血红蛋白即HbA、 HbA2 和 HbF。HbA(a2b2)是正常成人红细胞中的最主要的血红蛋白,占红细胞内血红蛋白总量的96 ...
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酵母双杂交实验常见问题
1.如果诱饵蛋白对酵母细胞是有毒的,该怎么办?在某些情况下,在液体培养基中培养不好的菌珠可以在固体培养基上生长得很好。首先重悬克隆于1ml的SD/–Trp,接着将重悬液平铺于5 个100-mm的SD/–Trp平板,在30℃下温浴,直至平板上的克隆相互粘在一起。用5ml 0.5X YPDA刮下每块板上的克隆,并收集到一管中,这样就可以使用这个细胞重悬液进行正常的杂交反应。 ...
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研究蛋白质相互作用的技术平台―酵母双杂交系统的发展和应用
随着对多种重要生物的大规模基因组测序工作的完成,基因工程领域又迎来了一个新的时代---功能基因组时代。它的任务就是对基因组中包含的全部基因的功能加以认识。生物体系的运作与蛋白质之间的互作密不可分,例如:DNA合成、基因转录激活、蛋白质翻译、修饰和定位以及信息传导等重要的生物过程均涉及到蛋白质复合体的作用。能够发现和验证在生物体中相互作用的蛋白质与核酸、蛋白质与蛋白质是认识它们生物学功能的第一步。 ...
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