【视频】2D电泳 实验教程 之 第二向电泳
第二向SDS-PAGE电泳 介绍1.配制10%的丙烯酰胺凝胶两块。配80ml凝胶溶液,每块凝胶40ml,将溶液分别注入玻璃板夹层中,上部留1cm的空间,用MilliQ水、乙醇或水饱和正丁醇封面,保持胶面平整。聚合30分钟。一般凝胶与上方液体分层后,表明凝胶已基本聚合。2.待凝胶凝固后,倒去分离胶表面的MilliQ水、乙醇或水饱和正丁醇,用MilliQ水冲洗。3.从-20℃冰箱中取出的胶条,先于室温放置10分钟,使其溶解。4.配 ...
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二维电泳
电泳即是离子在电场中的运动。
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双向电泳的样品的制备原则及步骤
样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响 2-DE 结果好坏。目前并 没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原 则:1)尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的 损失;2)减少对蛋白质的人为修饰;3)破坏蛋白质与其他生物大分子的相互作 用,并使蛋白质处于完全变性状态。根据这一原则,样品制备需要四种主要的试剂:离液剂(chao ...
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生物化学实验常用技术:电泳技术
带电颗粒在电场作用下向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳。如带正电荷的粒子向负极移动,带负电荷的粒子向正极移动。电泳技术是生物化学与分子生物学中的重要研究方法之一,利用电泳技术可分离许多生物物质,包括氨基酸、多肽、蛋白质、脂类、核苷、核苷酸及核酸等,并可用于分析物质的纯度和分子量的测定等。电泳的基本原理 许多生物分子都带有电荷,在电场作用下可发生移动。由于混合物中各组分所带电荷性质、数量以 ...
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