关键词: 双向电泳 蛋白点
来源: 互联网
3024 阅读
1. 用 PDQuest软件或肉眼比对,找出感兴趣的蛋白点,并做好标记和记录。
2. 用 MilliQ水冲洗胶 2 次。
3. 用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗 Ep 管
4. 将枪头(200μl)下端剪去,使其内径略小于蛋白斑点的直径,用色谱纯甲醇和MilliQ水冲洗枪头。
5. 对准斑点中央小心将蛋白切割下来,放入Ep 管,MilliQ水漂洗 2 次,如胶块 太大,将其切成 1 x 1 mm 的胶片。
6. 将切好的点做好标记和记录,置- 80℃ 保存或冻干后- 20℃ 存放。
注意事项:
1. 尽量避免皮肤和头发的角蛋白的污染,在操作过程中应戴一次性的 PE 手套 (不用乳胶手套)和帽子。
2. 不要将胶长期存放于乙酸溶液中。
3. Ep 管及染胶的容器必须用甲醇和水充分清洗,尤其应与进行Western blotting 的容器分开,以避免 casein 或 BSA 的污染。
更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!
为什么同一批次提取蛋白跑出的条带不一致
做这个实验的时,我同一批次提取的蛋白,胶跑出的条带都不一致,这是什么原因呢?
43 评论
WB 敷牛奶需要的时间
Western Blot 实验时敷牛奶大概多久?一定要过夜吗
42 评论
WB发光结果异常
我做WB也不算是新手,自己觉得整个过程也没有什么明显的问题,可是最后发光的时候内参整个是晕开的,分子还连成了一条线,之前没出现过这种情况,所以想请大家帮忙分析下,是胶的问题,蛋白的问题,还是什么别的,谢啦!
28 评论
本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。
我的询价
询价列表
暂时没有已询价产品
手机验证
科研好物关注研选号