关键词: 表面活性剂 膜蛋白 提取方法
来源: inventbiotech
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使用表面活性剂进行质膜蛋白分离有可能破坏蛋白质-蛋白质相互作用,改变膜蛋白的拓扑结构。
在一些下游应用中,例如膜蛋白 IP,Co-IP,酶检测,质谱分析实验,使用无表面活性剂的方法分离质膜蛋白远远好过使用表面活性剂的方法。多年来,已经开发了许多使用无表面活性剂方法提取质膜蛋白。大致可以分为以下三类方法:
传统的蔗糖梯度离心和双水相亲和性分离方法都需要通过特殊设备(匀浆机,搅拌机或超声波)匀浆来打破细胞膜,使用匀浆设备无法避免由于力度和时间不同造成的人为误差,是实验间差异的主要来源。
相比之下,使用离心管柱法提取膜蛋白,不需要使用任何匀浆设备,起始材料仅需 1*106 个细胞,并且试剂盒不使用表面活性剂,操作简便,速度快,性能好,离心管柱法提取膜蛋白将成为越来越多研究人员的正确选择!
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为什么同一批次提取蛋白跑出的条带不一致
做这个实验的时,我同一批次提取的蛋白,胶跑出的条带都不一致,这是什么原因呢?
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WB 敷牛奶需要的时间
Western Blot 实验时敷牛奶大概多久?一定要过夜吗
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WB发光结果异常
我做WB也不算是新手,自己觉得整个过程也没有什么明显的问题,可是最后发光的时候内参整个是晕开的,分子还连成了一条线,之前没出现过这种情况,所以想请大家帮忙分析下,是胶的问题,蛋白的问题,还是什么别的,谢啦!
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