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【实验技巧】丽春红染色

关键词: 2019-04-28 10:07 来源:英文特 点击次数:594

丽春红(Ponceau S)染色是 WB 实验中的一个重要环节,今天就来给大家详解丽春红染色的作用和操作方法。


丽春红染色作用

可用于 PVDF 膜,硝酸纤维素膜和和醋酸纤维素膜上的蛋白的检测。


丽春红染色原理

丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。


丽春红特性

丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS 或其它适当溶液洗去。


为什么要用丽春红染色?

通过丽春红染色可验证转膜效率,及每孔上样蛋白总量是否均等,可以帮助后续实验进行内参调整或问题分析。


特别说明:丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白检测。


操作方法


1. 将转印膜浸没在丽春红染色液中,用摇床孵育转印膜 1-30 分钟。


2. 取出转印膜,用去离子水冲洗膜直到背景干净(通常不超过 5 分钟),条带清晰,记录结果。染液可以继续用去离子水洗涤完全去除丽春红,进行后续的 WB 检测。



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