关键词: 阻断细胞内某一特定蛋白的表达
来源: 丁香园论坛
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lmnsmu wrote: 对你的蛋白认识较少,你查查文献看别人是怎么做的。提出以下想法,仅供参考: 1、可以使用抗体,抗体进入细胞核的可能性小; 2、你提到进核,B蛋白可能是转录因子,可以考虑使用类似于B蛋白的物质作为竞争性抑制剂,可以与相应的靶基因结合而不发挥作用; 3、如果B蛋白进核通过某种通道,选择通道阻断剂来阻止其发挥作用; 4、如果B蛋白通过受体发挥作用,选择其拮抗剂阻止其发挥作用。
feiji1984 wrote: 能不能这样子弄,B和A如果是结合在一起的,且你需要抗体进入细胞核,我是否可以猜测两者是一种转录因子复合物,也就是说他们是否结合在一条DNA链上,如果是这样,我认为可以不用阻断B蛋白,而是用chip进行沉淀,对a和b分别进行沉淀,对其结合的特异DN***段进行定量分析,这样子我认为可以找出两个蛋白在功能上的不同点,但前提是这两个蛋白都是转录因子。 另外如果用抗体封闭,貌似对A蛋白的功能也会构成影响。 望战友明确说明研究目的。欢迎拍砖。
yuqw2002 wrote: 一种是找B的专门的抑制剂,查查看有没有,如果没有的话,试着做 domain negative ,看外源表达的A活性的增加引起细胞的什么变化
wst207 wrote: 个人认为 domain negative 是最常规的思路 另外 RNAi后,恢复AB中的一个也是一种方式。
gyhit wrote: 是否可以通过抑制蛋白A的剪切抑制蛋白B的产生从而抑制蛋白B的活性嘞?(没接触过,问问)
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