何谓正义引物和反义引物?
我不是高手,但是试着回答一下。上游引物和下游引物是按照位置来分的。与mRNA相同的引物为正义引物,而与其互补的是反义引物。所以上游引物对应的是正义引物,下游引物对应的是反义引物。 (责任编辑:大汉昆仑王) ...
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PCR扩增分离目的DNA片段实验原理、材料和步骤
一、目的了解多聚合酶链反应DNA 扩增技术的基本原理和实验应用,掌握PCR反应基本技术。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域,它不仅可用于基因分离克隆和核酸序列分析,还可用于突变体和重组体的构建,基因表达调控的研究,基因多态性的分析,遗传病和传染病诊断,肿瘤机制 ...
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长片段PCR扩增中几个常见问题的解决办法
1. 当PCR结果不满意时考虑以下几个方面(1)将PCR反应的试管与反应板紧贴(2)使用50ul或更少反应体系时勿使用AmpliWax两个反应混合液=的操作方式在大多数情况下很有效(3)当酶反应混合物以70度"热启动"开始循环时切记在加入酶后稍微振荡一下因为在0.2ml的PCR管不能均匀传热.(4)不要随意减少dNTP的用量必需与其他成分保持平衡.&nb ...
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请教引物的稀释与使用的原则、步骤和注意事项
1. Oligo DNA是以OD260单位来计算的,这是指在1ml体积1cm光程标准比色皿中,260nm波长下吸光度为1A260的Oligo溶液定义为1 OD260单位,根据此定义,1 OD260单位相当于33μg的Oligo DNA,您可以根据此数据和您的Oligo DNA分子量,计算得到摩尔数以计算不同摩尔浓度的溶液。2. 引物序列的分子量计算公式如下:MW=(A碱基数×312)+(C碱 ...
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