实验Protocol
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  • 【求助】如何设计整个基因的克隆引物?

    gaoxiaomeng :^)woxingwosu 基因是不是可以简单理解为从ATG到终止密码子为止?如果是这样,那就没有多少选择,直接就是Forward: ATGNNNNNNReverse: STOP CODON NNNNN (注意要互补的~~)zjubell woxingwosu wrote:基因是不是可以简单理解为从ATG到终止密码子为止?如果是这样,那就没有多少选择,直接就是Forward: ATGNNNNNNReverse: STOP CODON NNN ...

    来源:丁香园论坛    3923 阅读

  • 克隆长期做不出来,最大的原因是实验习惯不好!

    我做不出来克隆的时间长达半年,期间克隆实验方面许多问题都遇到过,现在总结主要的一些问题和大家交流,希望大家以后不要犯我一样的错,少走弯路。1、感受态细菌本身有质粒污染,这个问题困扰了我三个月,一直到最近才找到原因,我这里犯了最大的错是没有做过感受态检测。也许大家奇怪为什么在三个月内的时间里没有怀疑到感受态,不用奇怪,因为感受态“表现的太正常了”,每次涂板都 ...

    来源:互联网    3914 阅读

  • RT-PCR大汇总

    一、RT-PCR逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。二、RT-PCR具体步骤详细参考:RT-PCR ...

    来源:互联网    3882 阅读

  • PCR 芯片技术 --纪念 Kary Mullis 获得诺奖 30 周年

    PCR仪器发展的趋势之一变得更加微型化, PCR芯片就是在这种趋势下诞生的。PCR芯片就是在微型的载体上进行PCR反应,是微型化的PCR仪。芯片PCR不仅节省了大量反应试剂因此降低了实验成本,还有助于提高反应速度。下面就让我们回顾下PCR芯片的发展历史:早在1994年Peter Wilding等人就通过在硅表面蚀刻的三维小室放入PCR反应物,然后通过半导体加热制冷片控制温度,扩增 ...

    来源:互联网    3848 阅读

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