关键词: 甲基化 特异性 PCR(MSP)
来源: 互联网
50529 阅读
1. MSP原理:MSP是一种简便、特异的、敏感的检测单基因甲基化的方式。其基本原理是用亚硫酸氢钠处理基因组DNA,未甲基化的胞嘧啶变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不变,然后用3对特异性的引物对所测基因的同一核苷酸序列进行扩增。扩增产物用DNA琼脂糖凝胶电泳,凝胶扫描观察分析结果。
(1)在50ul体系中,DNA(2~5 μg)经NaOH(终浓度值0.2 mol/L)在37℃变性10 Min。对于ng级别的人基因组DNA,在进行修饰前加入2μg蛙鱼精DNA为载体。
(2)加入30 μl刚配制好的10 mmo/L 氢醌与520/1的40.5%亚硫酸氢钠混匀,之后石蜡油隔绝空气的条件下,避光在50%温育16 h。
(3)修饰后的DNA过WizerdDNA纯化柱,用50/1 L 水洗脱。室温下用NaOH(终浓度为0.3 mol/L)修饰5 min,之后用乙醇沉淀。
(4)DNA溶于20 μl 水中,立即使用或在-20℃保存。
更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!
电泳时条带跑出凝胶,是什么情况?
电泳时条带跑出凝胶,是什么情况?不会没成功吧?
15 评论
双非博士真就如大家所说没有出路?
双非博士一枚,在老师的指导下,自己也算勤奋,发了三四篇SCI,其中有一篇顶刊,手头上还有一些工作没有处理完,本来心里有些自卑,面对现在外界所说双非博士的各种言论,导致自己有些不知所措。以后进高校,哪怕你有好文章也是会四处碰壁嘛?想问问过来人的经验。
14 评论
PCR有产物但是电泳无结果
PCR后用紫外分光测定DNA含量都在450-500ug/ul,但电泳无目的片段的条带,内参也没条带。电泳中maker能跑出条带,用引物也点了样,引物的条带稍模糊但还是有,请问是哪里出了问题?
13 评论
本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。
AceQ qPCR SYBR Green Master Mix(高特异性染料法定量PCR 检测试剂盒)(Q111)
南京诺唯赞生物科技股份有限公司
金牌会员 入驻 13 年
基因甲基化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒
上海杰美基因医药科技有限公司
金牌会员 入驻 16 年
武汉纯度生物科技有限公司
钻石会员 入驻 7 年
常州贝源鑫生物科技有限公司
金牌会员 入驻 10 年
上海哈灵生物科技有限公司
金牌会员 入驻 11 年
深圳子科生物科技有限公司
钻石会员 入驻 9 年
我的询价
询价列表
暂时没有已询价产品
手机验证
科研好物关注研选号