植物组织RNA提取的难点及对策
从植物组织中提取RNA是进行植物分子生物学方面研究的必要前提。因此,从植物组织中提取纯度高、完整性好的RNA是顺利进行上述研究的关键所在。
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人APC和TSC-2 cDNA的长5'RACE
利用RACE ,可以很简单地得到mRNA的5'末端序列,然而5'RACE是一个很复杂的技术,它的成功依赖每一步反应的有效完成(图1)。cDNA第一链的合成是由一个反义的基因特异性引物(Gene-specific primer,GSP)来起始的,cDNA第一链纯化后,利用末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)在cDNA的 ...
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RNA原位核酸杂交方法
一、基本原理是指运用寡核苷酸等探针检测细胞和组织的RNA表达的一种原位杂交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知RNA核苷酸片段,近核酸杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的Mrna、rRNA 和tRNA分子。RNA原位杂交不同于DNA原位杂交主要有:(1)使用的 ...
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siRNA 的化学修饰和临床应用
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