RNAi基础知识介绍
Rnai最近由于RNA 干扰(RNA interference,RNA i)的发现使反义领域的研究增多。这种自然发生的现象最早是在秀丽线虫中发现的(1),是序列特异性地使转录后的基因沉默的有力机制。由于最近两年在RNA i领域取得的进步,已经有许多这方面的综述发表(2-4)。RNA 干扰是由长的双链RNA 分子发动的,该分子可以被Dicer enzyme加工成长度为21-23个核苷酸的RNA ( ...
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【求助】microRNA逆转录
qisanni05 请问 做一种microRNA逆转录用哪家公司的试剂盒性价比较高?谢谢您的帮助!大鹏鸟 不知道你要做啥?RT-PCR?国内挺多的,不过广州复能基因的貌似挺全、挺专业的。http://www.fulengen.com/product/reagent/qpcr_detect.phpAll-in-One First-Strand cDNA Synthesis Kit采用RNase H活性缺失的莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV Rever ...
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人APC和TSC-2 cDNA的长5'RACE
利用RACE ,可以很简单地得到mRNA的5'末端序列,然而5'RACE是一个很复杂的技术,它的成功依赖每一步反应的有效完成(图1)。cDNA第一链的合成是由一个反义的基因特异性引物(Gene-specific primer,GSP)来起始的,cDNA第一链纯化后,利用末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)在cDNA的 ...
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mRNA纯化
mRNA的分离方法较多,其中以寡聚(dT)-纤维素柱层析法最为有效,已成为常规方法。此法利用mRNA 3‘末端含有Poly(A+)的特点,在RNA流经寡聚(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液的作用下,mRNA被特异地结合在柱上,当逐渐降低盐的浓度时或在低盐溶液和蒸馏水的情况下,mRNA被洗脱,经过两次寡聚(dT)纤维柱后,即可得到较高纯度的mRNA。
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