慢病毒载体概况及发展历程
1、慢病毒载体概况慢病毒是逆转录病毒科亚科之一,分为两类:灵长类和非灵长类慢病毒。灵长类慢病毒包括HIV-1、HIV-2、猴免疫缺陷病毒( SIV),非灵长类慢病毒包括猫免疫缺陷病毒(FIV)、牛免疫缺陷病毒(BIV)、马免疫缺陷病毒(EIAV)等。多项研究表明慢病毒载体具有可感染非分裂期细胞、可长期表达、而且宿主细胞免疫反应小、细胞毒性小等优点。因其自身结构特点,可包装8~lOkb,适用于 ...
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无需DNA酶消化、无毒、20分钟直接提取RNA试剂盒
随着荧光定量PCR仪器的推广。RNA表达水平的检测越来越灵敏,对于高质量的RNA,不残留基因组DNA或者残留尽可能少成为判断RNA提取产品质量好坏的一个重要指标。目前一般RNA提取剂提取的RNA残留DNA还比较多,甚至肉眼都可以见到明显残留。在此情况下,客户只能采取DNA酶消化,或者再次抽提的方法来减少残留,不仅大大增加了时间成本和经费成本,效果往往也不甚理想,甚至还常常降解RNA。
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【原创】肺组织RNA提取心得
小硕,刚进实验室不久,自己想的课题,外加老婆的建议和帮助下,RT-PCR外加琼脂糖电泳顺利跑了下来,前两天标本的目的基因及内参都P出来了,内心小高兴一把。图未上,等拷回来补传上来。虽然还有小毛病,但是起码还是有点结果了。说说肺组织提RNA,是癌旁5CM以及肿瘤组织切下来放液氮中冷冻,后转-80度冷藏。标本是守在手术室里面,一切下来就取的,不存在RNA降解问题。前期的标本是直接放进2ml离心管里面的,后来在从2ml离心 ...
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RNAi的基本知识
RNAi的定义: 目前对RNAi (RNA interference)的定义有很多种,不同的资料对其定义的侧重点也不尽相同,如果将RNAi看作一种生物学现象,可以有以下定义:① RNAi是由dsRNA介导的由特定酶参与的特异性基因沉默现象它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。② RNAi是有dsRNA参与指导的,以外源和内源mRNA为降解目标的转基因沉默现象。具有核苷酸序列 ...
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