酵母RNA的分离与组分鉴定
酵母细胞富含核酸,且核酸主要是RNA,含量为干菌体的2.67%~10.0%,而DNA含量较少,仅为0.03%~0.516%。为此提取RNA多以酵母为原料。工业上制备RNA多选用低成本、适于大规模操作的稀碱法或浓盐法。这两种方法所提取的核酸均为变性的RNA,主要用作制备单核苷酸的原料,其工艺比较简单。
来源:互联网 12211 阅读
RNA的提取和cDNA合成原理和实验方法
第一节 概 述 从真核生物的组织或细胞中提取mRNA ,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之cDNA的合成和克隆已成为当今真核分子生物学的基本手段。自70年代中 ...
来源:互联网 11185 阅读
【分享】invitrogen trizol 试剂盒说明书
从组织中提取总RNA1)液氮研磨,组织块直接放入研体中,加入少量液氮,迅速研磨,待组织变软,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按50-100mg组织/mlTrizol加入Trizol,转移入离心管进行第2步操作。2) 匀浆:组织样品按50-100mg/mlTrizol 加入Trizol,另外,组织体积不能超过Trizol体积的10%,否则匀浆效果会不好,用电动匀浆器充分匀浆约需1-2分钟。从细胞中提取总RNA1) 培养贴壁细胞:不须消化 ...
来源:丁香园论坛 10975 阅读
【求助】提取RNA,氯仿和异丙醇的保质期
能nca 各位师兄师姐,我做RNA提取了,很多遍了,到现在也不出结果,不知道哪里出了差错氯仿的保质期是多长时间啊,我师姐说氯仿从08年就买了,会不是时间太长了啊?liubingood 氯仿、异丙醇等这些化学试剂性质比较稳定,通常在说明书上不写保质期的,理论上可以长期保存,但是对于开封和未开封要区别对待。未开封的试剂试剂瓶的密封并不一定很严,多少会受外界水分等影响;一旦开封了就尽早使用,外界污染的可能性就存在了。通常对于这 ...
来源:丁香园论坛 10939 阅读