琼脂糖凝胶电泳检查PCR产物
琼脂糖凝胶电泳检查PCR产物(1) 用0.5 X 或1 X TBE 制备2%(W/V)琼脂糖凝胶,加入适量的溴化乙锭;(2) 琼脂糖凝胶的长度与宽度应该与PCR扩增管数量相适应,每一扩增管应有相应的一个电泳泳道,凝胶厚度为3~5mm,一般用三只梳子形成三排加样孔;(3) 将PCR扩增管从PCR扩增仪中取出,用加样器吸取扩增后的反应液,加入相应的 ...
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引物溶解引物保存
1. 如何测定引物的OD值?用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量,请注意紫外分光光度计的使用,测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2~0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,取部分溶液稀释到1 ml 并在1 ml 标准比色皿中测定其吸光度,即为所测体积的OD值,进而可以计算出母液的OD值。举例:您拿到一管干粉的DNA ...
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钙成像、电压成像及神经递质探针原理介绍
成像技术(Imaging)一、钙离子成像技术(Calcium imaging)钙离子成像技术(Calcium imaging)是指利用钙离子指示剂监测组织内钙离子浓度的方法。在神经系统研究中,我们常用钙离子成像技术监测神经元内钙离子的变化,提示神经元活动。有了钙成像技术,原本悄无声息的电生理活动就变成了一幅形象地、斑斓闪烁的壮观影像,研究人员可以同时大量追踪神经元活动,研究其关系,因而被全世界神经科学家们追捧。1)钙离子成 ...
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各种转染试剂的中文转染方法
FuGENE6(Roche)转染步骤:转染前一天将细胞分至培养板,转染当天细胞应50-80%融合。将细胞以1-3×105/2 ml接种于6孔板后孵育过夜将达到如此密度。将FuGENE6 Reagent在室温孵育10-15分钟。使用之前将FuGENE6颠倒混匀一下。1. 在PCR管中加入不含血清和双抗的营养液以稀释FuGENE6,直至总体积到100 ul。2. 将3-6 ul FuGENE6 Reagent直接加入营养液,轻弹管壁混合。3. 加入1-2 ug的 ...
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