【原创】marker常见问题分析
1 DNA条带不见或很淡,可能的原因及解决的方法:a DNA marker 上样量不够按照说明书加样,或者根据自己的实验样品调整加样。b DNA电泳跑出凝胶电泳时,将溴酚蓝跑到胶长的2/3处即可停止电泳。更小的DNA片段可能需要电泳的时间更短。比如1/2c DNA条带被示踪染料所遮盖选用不同的电泳loading dye,使待检测的DNA样品避开示踪染料的干扰,或者适当降低loading dye用量。d 凝胶中未加核酸染料,或者后染时核酸染色不均匀 . ...
来源:丁香园论坛 19506 阅读
DNA的琼脂糖凝胶电泳
DNA的琼脂糖凝胶电泳
来源:互联网 19501 阅读
【旧贴整理】花了2星期系统归纳关于电泳的各位老师旧帖,与大家分享 --电泳
一 问题与解决大片段DNA的电泳问题一个含有8KB,16KB,20KBDNA的样品,需要跑琼脂糖电泳分离、鉴定和回收,请问:1、用0.5%的胶行不行? 2、用什么样的MARKER,从哪里可以买到?1)最好用低熔点的胶了,但是回收的盒子可要选好的,片断太大了,回收的效率不高,0.5%的胶很嫩的,要小心。实在不行可以用0.7%的,30伏左右低电压,最好把电泳槽放在冰箱里,低温下电泳.这种大小的DNA根本无需0.5%的凝胶,用1%即可。DNA ...
来源:丁香园论坛 19313 阅读
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)
凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。 其基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后(如下图所示)。该方法可用于检测DNA结合蛋白、RNA结合蛋白 ...
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