植物基因组DNA的提取及含量纯度检测
目的意义DNA是遗传信息的载体和基本遗传物质,它在遗传变异、代谢调控等方面起着重要作用,是分子生物学和基因工程研究的对象,但无论是研究植物DNA的结构和功能,还是开展外源DNA的转化、转导的研究,首先要做的就是从植物组织中提取天然状态的高分子量的纯化DNA。因此,本实验的目的是学习植物基因组DNA提取方法、原理和DNA的鉴定技术。Ⅰ 植物基因组DNA 的提取(CTAB法)一、原理植物组织中绝大部分 ...
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SDS法提取植物基因组DNA
本方法由DellaportaWood和Hicks(1983)的方法修改而成。其基本原理是研磨的组织细胞用热的SDS裂解后,加入高浓度的KAc,0℃放置以除去蛋白和多糖类杂质,最后用乙醇或异丙醇沉淀。一 材料、试剂和仪器1 材料 新鲜的组织材料或-80℃冻存的材料2 试剂(1)提取缓冲液Tris-HCl 100mmol/L(pH8.0)EDTA 50mmol/L (pH8.0)NaCl ...
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人类基因组DNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析
实验目的: 1.熟悉分子生物学实验的操作特点。 2.掌握人类基因组DNA提取的基本原理。 3.熟悉人类基因组DNA提取的基本方法。 4.熟悉琼脂糖凝胶电泳的原理和操作。实验原理: 用细胞裂解液裂解细胞膜,收集细胞核,加入SDS破裂核膜,用蛋白酶K使核蛋白降解成小片段并从DNA上解离下来,经苯酚�氯仿抽提去除蛋白质,无水乙醇沉淀DNA,75%乙醇洗涤DNA沉淀,真空干燥后,溶解于TE中即得 ...
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质粒DNA的提取及电泳分析
【实验目的】 1.掌握碱裂解法小量提取质粒DNA的原理和方法。 2.掌握琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA方法。 3.熟悉质粒DNA提取与真核细胞核DNA提取的异同点。【实验原理】 在pH值为12.0~12.6的碱性环境中,在去垢剂SDS的作用下,细菌的细胞壁与细胞膜均破裂,释放出大量的染色体DNA、RNA及质粒DNA。此时,所有双链DNA解聚成单链,但质粒DNA仍保持环状。当pH值恢复到中性时 ...
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