1×HBS (pH7.4): 将8.76 g NaCl 溶解于900 ml 超纯水,加入20 ml 1 M 的HEPES,调pH 值到7.4,定容至1 L,过滤(0.2 μm 滤膜)后储存于4℃备用。
方法:
1.细胞分盘: 通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105 至8×105细胞/cm2 的密度平铺细胞于60 mm 组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。根据细胞贴壁情况于含5% CO2 的37℃温箱中孵育8-24 h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2 mL 预热的无血清培养基。