关键词: 基因敲除
来源: 互联网
97851 阅读
(3)诱导性基因敲除法
诱导性基因敲除也是以Cre/loxp 系统为基础,但却是利用控制Cre 表达的启动子的活性或所表达的Cre 酶活性具有可诱导的特点,通过对诱导剂给予时间的控制或利用Cre 基因定位表达系统中载体的宿主细胞特异性和将该表达系统转移到动物体内的过程在时间上的可控性,从而在1oxP 动物的一定发育阶段和一定组织细胞中实现对特定基因进行遗传修饰之目的的基因敲除技术。人们可以通过对诱导剂给予时间的预先设计的方式来对动物基因突变的时空特异性进行人为控制、以避免出现死胎或动物出生后不久即死亡的现象。常见的几种诱导性类型如下:四环素诱导型(图4);干扰素诱导型;激素诱导型;腺病毒介导型。
诱导性基因敲除优点:
① 诱导基因突变的时间可人为控制;
② 可避免因基因突变而致死胎的问题
③ 在2 个loxP 位点之间的重组率较高;
④如用病毒或配体/DNA 复合物等基因转移系统来介导Cre 的表达,则可省去建立携带Cre 的转基因动物的过程。[10]
2.2 利用随机插入突变进行基因敲除。
2.2.1 原理:
此法利用某些能随机插入基因序列的病毒,细菌或其他基因载体,在目标细胞基因组中进行随机插入突变,建立一个携带随机插入突变的细胞库,然后通过相应的标记进行筛选获得相应的基因敲除细胞(原理见图5)[11,12] 。根据细胞的不同,插入载体的选择也有所不同。逆转率病毒可用于动植物细胞的插入;对于植物细胞而言农杆菌介导的T-DNA转化和转座子比较常用;噬菌体可用于细菌基因敲除。
插入了靶目标的基因转录翻译出无活性的目标蛋白随机插入内含子中
.需要敲除的靶基因转录翻译出活性蛋白
图6:基因捕获法的基本原理图
更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!
小树洞:你们工作后第一个月都得了多少工资呢?
妇产专硕18年刚毕业,四证合一。找了个市级三甲医院,合同的。工作一个月,当时发工资,968元。之前应聘的时候说前三月试用期1300 元。试用期过后加奖金,没想到,呵呵,租房一月1000元。今天直接崩溃。打算明天打电话问财务扣的都是什么钱,了解清楚后闪人。回家继承祖业—烤地瓜,烤玉米走起。你们工作后第一个月都得多少工资呢?
16 评论
抗体保存
用奶粉或者BSA配好的一抗/二抗可以在—20度保存多久?大约几个星期还是一两个月?
7 评论
DNA提取有杂带
PCR产物用试剂盒回收的时候,发现有杂带?有哪些办法可以提取得更干净?
5 评论
本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。
基因敲除小鼠
上海中乔新舟生物科技有限公司
钻石会员 入驻 15 年
TetraOne基因敲除/敲入小鼠
威斯腾生物
金牌会员 入驻 14 年
Mecp2 基因敲除小鼠
杰克森医疗科技(上海)有限公司
钻石会员 入驻 5 年
LANCETR-FRET 技术
Revvity
金牌会员 入驻 7 年
一站式CRO技术服务
北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)
金牌会员 入驻 16 年
外泌体研究技术服务
上海宇玫博生物科技有限公司
金牌会员 入驻 9 年
我的询价
询价列表
暂时没有已询价产品
手机验证
科研好物关注研选号