师弟问了我 25 个引物相关的问题
1. 引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种 主要都是由ABI/PE 公司生产,而Bioneer自行研制的专利384并行高通量DNA合成仪,可实现99%的高合成率。无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,主要差别在于合成产率的高低,试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。 亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定 ...
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基因敲除技术
一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较成功的有基因的插入突变和iRNA ,它们同样可以达到基因敲除的目的。二.实现基因敲除的多种原理和方法 ...
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DAPI染DNA的原理及使用方法
DAPI 即4'6-二脒基-2-苯基吲哚(4'6-diamidino-2-phenylindole),分子式为C16H15N5·2C3H6O3 ,分子量457.48。DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的 ...
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【求助】NC 和mock都代表什么意思?
wywdxfsh 经常看见文献里提到这2个单词,我没搞明白,举个例子,比如我用lipo2000转染一个质粒,在设对照的时候,一个孔只加Lipo2000,一个空什么也没加,那这两个空分别叫什么呢?先谢过走过路过的xdjm,更谢谢留言回复的同志!:)freecell NC: non-specific control,非特异性对照 ,例如你的问题中的“只加Lipo2000”,以探讨某种效应是否由转染试剂影响的。mock: 空白对照,例如你的问题中的 . ...
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