MTT实验的一些细节问题
细胞:1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。2.药物浓度的设定。一定要多看 ...
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【求助】NC 和mock都代表什么意思?
wywdxfsh 经常看见文献里提到这2个单词,我没搞明白,举个例子,比如我用lipo2000转染一个质粒,在设对照的时候,一个孔只加Lipo2000,一个空什么也没加,那这两个空分别叫什么呢?先谢过走过路过的xdjm,更谢谢留言回复的同志!:)freecell NC: non-specific control,非特异性对照 ,例如你的问题中的“只加Lipo2000”,以探讨某种效应是否由转染试剂影响的。mock: 空白对照,例如你的问题中的 . ...
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血球计数板细胞计数法
细胞计数法是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用计数板(血球计数板)进行。即可用于分离(散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何,均须制备分散的细胞悬液。一、步骤1、制备细胞悬液:对于悬液培养的细胞,可直接进行下面的步骤2(计数与计算过程)。如果计数对象为贴壁生长的细胞,首先需将培养物按如下步骤制备成细胞悬液。1)、 ...
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什么是上下游引物
引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反应、测序和探针合成等。自然中存在有生物的DNA复制引物(RNA引物)和聚合酶链式反 ...
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