标签: 活细胞 间接 免疫荧光法
活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。
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时间,温度
一、“ 加荧光标记抗鼠抗体(第二抗体)工作液20ul,混匀振荡置4℃/30分钟(时间不能超过)。”请问这步必须是4℃/30分钟吗?时间不能超过,如果超过了会有什么影响?二、细胞免疫荧光会有4%多聚甲醛固定,1%BSA封闭,您这里都没有提到,这两步可以不要吗?省去会有什么影响?谢谢!
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