后面的程序必须用玻璃容器。为了玻璃珠子的活化,添加 25 ml 二氯甲醇、1.5 g 三乙胺和 5 g 对硝基苯酰氯化物,回流煮沸 4 h,要避免潮湿。珠子用 10 ml 二氯甲醇冲洗 3 次,在 55℃ 短暂干燥。之后为了自由氨基的重氮化作用,这些珠子被转移到含 1 g NaNO2 的 100 ml 2 mol/L HCl 溶液中,在室温静置 20 min。用水剧烈地冲洗珠子后,将珠子在 40 ml 含 2 g 连二亚硫酸钠的 40 ml 水溶液中回流 lh。芳基胺珠子形成,用 20 ml 的水冲洗三次,转移到圆底的长颈瓶中,添加 88 ml 的 2 mol/L HCl。长颈瓶被安装在旋转的脱水器上,在冰浴中旋转,保证在 0℃ 冰浴。在 20 min 内,将 1.12 g 的 NaNO2 慢慢地添加一部分,在其间长颈瓶在非真空状态下一直转动,在添加了最后一部分之后,长颈瓶必须用一个弱的喷水式真空推进器旋转 10 min(大约 20 mbar),用于排出含氮气体。产生的重氮基玻璃用 20 ml 的冰水冲洗 3 次,之后必须马上用于固定。在用于固定之前的这段时间必须保存于 4℃。