标签: 胰凝乳蛋白酶酶学实验手册第三章
此次介绍优先切割Tyr、Trp、Phe、Leu氨基酸后肽键的蛋白酶。来源:《酶学实验手册》
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实验所需「试剂」具体见「其他」
在 25℃。测定 405 nm 吸光值增加,对硝基苯胺的吸收系数为 ε405=10.2×103 l(mol · cm)
试剂:
0.2 mol/L 三甲醇胺-NaOH,pH 7.8(TEA,37.13 g TEA-HCl,2.2 g 氯化钙溶于 800 ml H2O。用 2 mol/L NaOH 调节 pH 7.8,加水至 1 L),即缓冲液Ⅰ
0.2 mol/L 三甲醇胺-NaOH,pH 7.8(TEA,37.13 g TEA-HCl 溶于 800 ml H2O。用 2 mol/L NaOH 调节 pH 7.8,加水至 1 L),即缓冲液Ⅰ
60 umol/L α-胰凝乳蛋白酶(15.2 mg 溶于 10 ml 1 mmol/L HCl 中)
0.1 mol/L N-琥珀酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺(SUPHEPA;Mr=385.4;385 mg溶于 10 ml 缓冲液Ⅱ)
测定 25℃、405 nm 处光吸收值的增加,对硝基苯胺的吸收系数 ε405=10.2×103 l(mol · cm)。
0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.6
10 mmol/L GLUPHEPA(N-谷氨酰-L-苯丙氨酰对硝基苯胺,Mr=399.4;40 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸钾缓冲液,pH 7.6 )
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