RNA抽提后出现奇怪情况

RNA抽提后出现奇怪情况

九尾狐玉藻 19 评论 323 阅读

按步骤用50mg的小鼠肝脏提取总RNA,用预冷的研钵和-70度保存的trizol共研磨组织,氯仿分层,异丙醇沉淀,75%乙醇洗一遍,风干后depc水溶解沉淀,1.5%的琼脂糖电泳220V,20min,结果图如下,各位大神能帮我看看是什么情况吗?

超方便的实验干货查询工具

微信扫码进入「丁香实验」小程序

19 条评论
  1/4  

  • 可能是提取的RNA含有杂质或不纯!

  • 主要考虑配胶的问题。胶没有充分混匀存在拖尾。RNA一般都会有降解。跑胶时间太长

  • shgenwu 2014-10-06  1

    同意楼上,应该跑MOPS缓冲液的甲醛变性电泳才能看到28s:18s约2:1,而且RNA也要预先变性出来,不是直接跑DNA胶。

  • DD_BB 2014-09-24  1

    测OD值不是更直接?

  • 我觉得主要问题不像是降解,降解肯定是有,但主要的问题是18S和28S的比例不对,应该是2倍关系,你这个看不大出来,降解的话会出现很明显的条带,5s太亮,另外貌似条带只有3条,不像是有杂质污染等(主要是DNA),可能的主要问题是操作中的丢失,建议严格操作步骤,低温离心,弃去上清液要注意,最后75%酒精处理要尽量在冰上风干,可以用枪头把多余的酒精引流出来,最后我觉得用1%的胶比较好,跑的时间短,降解的机会,程度都要小。

  • 请登录后参与评论,

    我的询价

    询价列表

    暂时没有已询价产品

    inquiry icon 快捷询价
      当你希望让更多商家联系你时,可以勾选后发送询价,平台会将你的询价消息推荐给更多商家。
      个人名片

      编辑个人名片

      编辑
      yanxuan

      关注「丁香通研选」

      微信及时获得商家回复,

      获得更多交易信息和保障。

      丁香实验小程序

      微信关注
      丁香实验

      意见反馈