标签: 荚膜染色 微生物学实验第三版
本实验介绍3种荚膜染色法:湿墨水法、干墨水法和Anthony氏法。其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。来源:《微生物学实验(第三版)》
0 收藏 0 阅读
荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。
1. 制备菌和墨水混合液
加一滴墨水于洁净的载玻片上,然后挑取少量菌体与其混合均匀。
2. 加盖玻片
将一洁净盖玻片盖在混合液上,然后在盖玻片上放一张滤纸,轻轻桉压以吸去多余的混合液。
3. 镜检
用低倍镜和高倍镜观察,若用相差显微镜观察效果更好。
背景灰色,菌体较暗,在藏体周围呈现明亮的透明圈即为荚膜。
加盖玻片时勿冒气泡,以免影响观察。
1. 制混合液
加一滴 6% 葡萄糖液于洁净载玻片的一端,然后挑取少量菌体与其混合,再加一环墨水,充分混匀。
2. 涂片
另取一端边缘光滑的载玻片作推片,将推片一端的边缘置于混合液前方,然后稍向后拉,当推片与混合液接触后,轻轻左右移动,使之沿推片接触的后缘散开,尔后以大约 30° 角迅速将混合液推向玻片另一端,使混合液铺成薄层(图 IV-4)。
3. 干燥
空气中自然干燥。
4. 固定
用甲醇浸没涂片固定一分钟,倾去甲醇。
5. 干燥
在酒精灯上方用文火干燥。
6. 染色
用甲基紫染 1~2 min。
7. 水洗
用自来水轻轻冲洗,自然干燥。
8. 镜检
用低倍和高倍镜观察。
背景灰色,菌体紫色,菌体周围的清晰透明圈为荚膜。
1. 涂片
按常规取菌涂片。
2. 固定
空气中自然干燥令不可加热干燥固定。
3. 染色
用 1% 的结晶紫水溶液染色 2 min。
4. 脱色
以 20% 的硫酸铜水溶液冲洗,用吸水纸吸干残液。
5. 镜检
干后用油镜观察。
菌体染成深紫色,菌体周围的荚膜呈淡紫色。
更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!
本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。
承接实验服务 MiRNA 服务
北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司
金牌会员 入驻 15 年
微生物学实验(高教材)(第三版)(沉萍 等主编).pdf
上海北诺生物科技有限公司
钻石会员 入驻 13 年
我的询价
询价列表
暂时没有已询价产品
手机验证
科研好物关注研选号