下面的实验流程详细描述用 CSR 在 E.coli 中对 Taq 聚合酶突变体的筛选。这个方法保证在标准的 PCR 反应条件下,聚合酶突变体是有活性的。用来产生文库的方法是核苷酸类似物 [27] 和易错 PCR [28],这里不再描述。引物 1 ( 5'-C A G G A A A C A G C T A T G A C A A A A A T C T A G A T A AC G AG G G C AA-3' ) 针对表达载体 pASK75 [29] 是特异的,用 XbaI 和 SalⅠ将 Taq 基因连接到载体 pASK75。引物 2(5'- G TA A A A CGA CGG CCA GTA CC AC CG AAC TG CG GG TG ACG CC AAGC-3' ) 针对表达载体 PASK75 是特异的。每个引物含有 5' 的突起黏末端,这样可以用引物 3 ( 5'-C AG G AAAC AG C TATG AC-3' ) 和 4 ( 5'-GTA A A A CGA CGG CCA GT-3' ) 来加强 CSR 的筛选。