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细胞死亡时的质膜变化实验

标签: 细胞死亡 质膜变化 细胞实验指南 第1章 第20节

本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。

实验方法
  • 磷酯酰丝氨酸外化的检测
  • PI吸收分析
实验材料
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 在 96 孔圆底组织培养板每孔中加入 100 μl 细胞样品,200 g 离心 5 分钟。

2. 吸出上清,在结合缓冲液中用 100 μl 膜联蛋白 V-FfffC 重悬细胞。室温避光培育 5 分钟。加入 100 μl HEPES 缓冲液,将样品转移至 FACS 微管中。



3. 在进行 FACS 分析之前,加入 20 μl PI。用散点图或密度图分析结果,绘出 EL1XFL2。膜联蛋白 V 阳性,PI 阴性细胞即为凋亡。双染细胞或是坏死,或是凋亡晚期。

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试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1. 配制 100 μg/ml PI 母液。此溶液可在 4℃ 避光保存数月。

2. 收获细胞至流式细胞计量管中,加 1/10 体积的 PI 母液。

3. 用 FSCXFL2 窗口对样品立即进行流式细胞计量分析。
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