标签: 免疫检测 荧光探针 促红细胞生成素
就临床应用而言,EPO的测定主要经历了三个阶段:1、生物体内测定法;2、生物体外测定法;3、免疫测定法。其中后期发展起来的免疫测定法是目前应用最广泛的临床检测EPO的方法。
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酶联免疫法没有放射性,并且在显色机理和方法的选择上比较灵活(目前见于报道的有 ELISA 法)。但由于酶法建立在光度法基础上,受显色剂有限的吸光度和动力学范围的限制,故灵敏度不高。因此 Rossi-R 等在检测中以单克隆抗体代替以往的多克隆抗体,使酶联免疫法的灵敏度得到进一步的提高,对体液中 EPO 含量的检测达到了 10-11M的灵敏度(与放免法相当)。
荧光免疫检测(FIA)是非放射免疫法中灵敏度最高的,它常用来检测含量很低的生物活性物质。近年来利用特殊的荧光探针,建立有效的 FIA 法对 EPO 进行检测也成为众多学者关注的点,如从螺旋藻中提取藻胆蛋白作为荧光探针等。
此外化学放光免疫分析(CLIA)是另一个较为活跃的研究领域,它具有灵敏度高、本底低的特点。且 CLIA 的灵敏度一般均高于酶免疫分析法。目前已有利用 CLIA 原理制成了试剂盒出售
1.EPO 在体液中含量低。正常人体液中 EPO 的含量仅为每毫升纳克级,血液中为130-230ng/mL。
2.EPO 与 rhEPO 结构相似。两者具有完全相同的氨基酸序列,仅 N 端所接的糖基略有差别。
3.EPO 在血液中的半衰期短。一般报道静注为5-6小时。
4.个体之间及个体本身的 EPO 浓度差异很大。
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