如果是免疫荧光的话建议冰冻切片,如果是普通免疫组化使用石蜡切片更好。并建议在上述站友的基础上,在30%蔗糖脱水前使用20%蔗糖脱水一次,效果更好,待样品沉底,可以换30%蔗糖
常规做法,冰冻切片 (GFP和RFP 荧光蛋白)1)4% 多聚甲醛固定,室温3-6小时,2)换新鲜固定液4度 overnight, 3)PBS洗一次,4)换30% sucrose in PBS,直道样品沉底5)换1:1 of 30% sucrose in PBS : OCT,overnight or few hours,6) 换100% OCT overnight or few hours,7)包埋,-70度 贮存,8)切之前把样品转移到冷冻切片机里,至少半小时或者简单的办法,取样品的时候,直接液氮冷冻,-80度贮存,然后切片之前转移到冰冻切片机里半小时,再切片。 但是形态学不太好!
我们实验室的做法与mhqman的方法一致