15. 考马斯亮蓝蛋白染色:0.24% 考马斯亮蓝,45% 甲酵的 10% 冰醋酸水溶液,用来标定 PACE 电泳的时间。
二、试验方法
1. 检测
(1) 用去污剂仔细清洗每个凝胶板并用水冲干净,然后再用乙醇淋洗,理想硅化板可以保证灌注后凝胶混合物均匀分布。如图 11.6 所示安装凝胶板、梳子和垫片,将其旋转 90°。滑动取出上部的垫片(S)创造一个灌胶的空隙,在 B 和 P 相对的毎个缺口的顶部之间画线,标定每个肽浓度凝胶的灌注高度,标记每个道并记录所使用的肽储存液浓度。
(2) 制备 200 ml 凝胶混合物:0.5X TBE,15% ( 29:1)丙烯酰胺,0.02% 的过硫酸铵(20 ml 5X TBE 储存液,75 ml 40% 的丙烯酰胺储疗液,400 μl 10% 的 AP,104.6 ml 重蒸水)。使用时添加盐(Na+,K+,Mg2+ 等)、去污剂或其他缓冲液成分到合适的终浓度。为了快速完全聚合,使用真空抽气机进行脱气,直到不强烈的产生气泡。如果使用去污剂,要在脱气以后加入,凝胶混合物终体积为 200 ml。