吴负染条带,只有正染条带

吴负染条带,只有正染条带

cxx19880716 4 评论 86 阅读

做了几次明胶酶谱实验,染色脱色后均出现正染条带,吴负染条带,请高手指点

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4 条评论
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  • lmnsmu 2013-06-18  0

    明胶酶谱是非变性电泳,上样Buffer中不能有DTT等变性剂;电泳过程最好在4度进行。

  • 明胶酶谱结果应该是深蓝色背景上的透明条带。其他染色的蓝色条带为其他非明胶酶类蛋白质。出现以上的结果可能有以下原因:1,样品中酶活性本身比较低,建议加大上样量或者测一下MMP表达情况。2,在电泳结束复性的时候延长时间,中途换几次洗脱液 3.孵育过程在37度,时间可以延长到48h 4.注意上样缓冲液,洗脱液,孵育液的PH值和离子强度一定要对,5电泳的时候保持低温,样品不可煮沸

  • chaomindai 2013-06-16  0

    看这图明胶没问题。marker都染出来了,说明染的是蛋白,跟MMP活性不一回事。我最近也在做,没出来理想结果,在摸索中。

  • cpu09 2013-06-13  0

    检查一下,是不是用的gelatin 有问题呀,或者是孵育液的ph值对不对,有没有加二价金属离子

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