2) 将约 30 ml 的松散结合的卵转移到一个 250 ml 的广口玻璃杯中,用高盐的 MBS 反复冲洗几次后,用塑料移液管吸去细胞碎片以及已死亡的卵细胞。尽可能多的去除上清缓冲液加人 100 ml 溶液 A, 重复以上操作 2〜3 次。^不时涡旋振动悬浮的卵,并持续 5〜lOmin 当蚌卵所占的体积显著性的减少时,说明卵外层的胶状衣鞘已逐渐溶解。此时,闻用溶液 A 冲洗蛙卵,然后弃去溶液,重复儿次后将蛙卵转人冰预冷的溶液 B 中,
3) 用广口移液管耗轻将蛙卵吸到 4 个 2 ml 的离心管巾,在此过程中应尽可能少的吸入浴液 B 上,蛙卵靜置约 1 min 后仔细地吸去上清,然后在液面上梗盖一层 VersihjbeVF50, 并于 4℃ 以 500 g 离心 1 min。离心后,蛙卵应紧靠在一起,但不应破裂。离心结束时. 溶液 B 应位于最上层,Vei^lubeVF50 层位于中间,而蛙卵则位于最下层。