标签： 酶切
酶切可用于：（1）获得粘性末端进行连接；（2）验证DNA重组是否成功；（3）验证质粒酶切位点是否有效。
104 收藏 13983 阅读
评价一下这个实验（50字以内）
同步到丁香客 提交评分
采用粘末端连接必须对目的DNA分子和载体分子进行酶切以获得相应的粘末端进行连接。酶切可以是单酶切也可以是双酶切。单酶切操作比较简单，但双酶切如果两种酶所用缓冲液成分不同（主要是盐离子浓度不同）或反应温度不同，这时可以采用如下措施解决：1）先用一种酶切，然后乙醇沉淀回收DNA分子后再用另外一种酶切；2）先进行低盐要求的酶酶切，然后添加盐离子浓度到高盐的酶反应要求，加入第二种酶进行酶切；3）使用通用缓冲液进行双酶切。具体要根据酶的反应要求进行，尽量避免星号活力。
酶切反应中添加酶的量应控制在什么范围，为什么？
2 评论
酶切之后就可以直接电泳了吗？
PCR产物纯化之后又把产物作为模板再进行一次PCR是能够跑出条带的，然后就拿纯化产物进行酶切，用的是takara的HhaI，酶切1h，之后用那个loading buffer停止酶切，直接拿酶切完的产物和纯化的产物对比跑胶，结果连纯化的都没有条带，我想问一下，最后这个跑胶之前不用什么染色之类的吧？为什么连纯化的都没有条带呢？已经做了好几次了，都没有，郁闷啊！求大神指点！
1 评论
提质粒后直接酶切嘛
酶切材料质粒DNA 直接从种子液提质粒之后就可以用来酶切了吗
0 评论
本网站所有注明“来源：丁香园”的文字、图片和音视频资料，版权均属于丁香园所有，非经授权，任何媒体、网站或个人不得转载，授权转载时须注明“来源：丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系，我们将立即进行删除处理。
人黑色素细胞抗体（MC Ab）elisa试剂盒
厦门仑昌硕生物科技有限公司
金牌会员 入驻 1 年
iTRAQ 定量蛋白质组
武汉华美生物工程有限公司CUSABIO®
金牌会员 入驻 9 年
miRNA 荧光素酶质粒构建
百奥迈科生物技术有限公司
金牌会员 入驻 13 年
基于Edman降解的蛋白质N端测序
北京百泰派克生物科技有限公司
金牌会员 入驻 4 年
CloneSmarter—TOPO载体克隆试剂盒（amp抗性，适用于末端加A片段克隆）-中美泰和独家代理
中美泰和生物技术（北京）有限公司
金牌会员 入驻 7 年
载体构建
北京亿鸣复兴生物科技有限公司
金牌会员 入驻 8 年
orgazmo
觉得 很简单
除非酶活性有问题,不然很难出错
antaisui
觉得 一般
不错
凡凡凡123
还挺简单的。
HR微生物
觉得 简单
用好酶
肉丸001
挺简单，但出问题的时候会蛋疼死你
我的询价
询价列表
暂时没有已询价产品
编辑个人名片
关注「丁香通研选」
微信及时获得商家回复，
获得更多交易信息和保障。
最新资讯关注丁香实验
快捷询价
