发布求购 用户服务
产品 实验 品牌

细胞伤口愈合实验

细胞伤口愈合实验

标签： 细胞 伤口愈合 培养

细胞伤口愈合实验被研究者广泛应用和改进，用来研究各种实验条件比如基因敲除和化疗在细胞迁移和增殖中的作用。该实验的优势在于（1）操作简单（2）费用廉价（3）实验条件容易根据不同的目的改进。

13 收藏 2876 阅读

详情
  • 细胞伤口愈合实验
实验方法原理 在单层培养细胞间制作划痕以产生愈伤区域，然后监控该伤口周围细胞的向划痕迁移的现象，即伤口愈合。改变细胞迁移和/或生长的因素可以增加或降低伤口愈合率。该方法可以定量，适用于自动化系统高通量筛选。
实验材料
人MDA-MB-231细胞
试剂、试剂盒
DMEM培养基 胎牛血清 PBS 戊二醛 乙醇 结晶紫
仪器、耗材
24孔培养板 枪头 细胞培养仪
实验步骤

1.细胞在含有10%FBS的DMEM培养基中生长。


2.细胞以一定密度接种到24孔细胞培养板中，生长24小时后，单层细胞融合度应达到70-80%。


3.不要更换培养基。用新的1ml枪头轻轻的在单层培养细胞间划痕，划痕横穿过孔，枪头尽量与板孔的底部垂直，不要倾斜。这样产生的gap的距离才与枪头末端的外直径相等。Gap的距离可以选用不同型号的枪头调节。划痕在同一方向成一条直线。


4.在垂直与第一条划痕的方向制作另一条划痕，每孔划痕成十字交叉型。


5.划痕后，用培养基轻轻的清洗板孔2次，以去除脱落细胞。


6.每孔添加新鲜培养基。


7.（培养基中含有某些成分，如抑制/促进细胞迁移和/或增殖的化学物质）


8.细胞生长48小时（或根据时间需要）。


9. 1xPBS清洗细胞两次，然后使用3.7%多聚甲醛固定30分钟。


10. 1%的结晶紫（2%乙醇溶解）染色30分钟。
注意事项 为了降低实验结果的可变性，建议每孔选择多个视野观察，每组做多个重复。
其他 gap的距离可通过Photoshop或ImagJ软件测量，为了降低实验结果的可变性，建议每孔选择多个视野观察，每组做多个重复。 

经验交流（1）

  • 星晴zx

    HUVEC做transwell迁移实验膜上没有细胞

    最近在做transwell预实验，用的Millipore transwell小室，8um孔径，说明书说不用铺胶，每孔10万个细胞，试了不同的培养时间，用结晶紫或DAPI染色后，发现膜上都没有细胞，只有类似下图中的圆圈，看着也不是细胞，加了因子的实验组圆圈数量要比对照组多。初次做这个实验，不知道是什么原因，恳请高手帮我分析一下。

      4 评论

    • 发表经验交流

    感兴趣的产品

    感兴趣的商家

    版权声明

    本网站所有注明“来源：丁香园”的文字、图片和音视频资料，版权均属于丁香园所有，非经授权，任何媒体、网站或个人不得转载，授权转载时须注明“来源：丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者，不希望被转载的媒体或个人可与我们联系，我们将立即进行删除处理。

    移动版： 实验详情页

    相关实验Protocol 更多

  • 植物体内可溶性糖含量的测定(蒽酮法)
  • 脯氨酸含量的测定
  • 植物茎的结构及其功能的观察
  • 叶绿素含量的测定（分光光度法）
  • 还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的测定
  • 植物体内可溶性蛋白含量的测定
  • 淀粉酶活性的测定
  • 植物花粉母细胞减数分裂染色体制片与观察

    • 谁能提供帮助

  • 伤口愈合斑马鱼实验

    杭州环特生物科技股份有限公司

     VIP供应商   入驻 6 年

    在线沟通

  • 划痕实验／伤口愈合3孔插件／培养皿

    麒盟（上海）生物医学有限公司

     VIP供应商   入驻 6 年

    在线沟通

  • IBIDI易必迪划痕实验／伤口愈合3孔插件／培养皿

    广州科适特科学仪器有限公司

     VIP供应商   入驻 3 年

    在线沟通

  • 细胞实验

    上海乾途生物科技有限公司

     B-VIP供应商   入驻 1 年

    在线沟通

  • 细胞Transwell实验

    基尔顿生物科技（上海）有限公司

     签约供应商   入驻 10 年

    在线沟通

  • 细胞实验服务/细胞功能学实验

    深圳市上为生物科技有限公司

     签约供应商   入驻 3 年

    在线沟通

    • 谁做这个实验？ 更多

  • 神经小摩羯

    神经小摩羯

    觉得 难

    挺好的实验

    • 谁收藏这个实验？ 更多

  • 唛唛no唛唛 唛唛no唛唛
  • 丫丫呀RX4I 丫丫呀RX4I
  • 小笨鸟飞呀飞 小笨鸟飞呀飞
  • 名赋其时Ghost丶 名赋其时Ghost丶
  • 靠山王 靠山王
  • 流风回雪_o9m1 流风回雪_o9m1
  • dxy_aexgx7d dxy_aexgx7d
  • dxy_8161p37 dxy_8161p37
  • 不萌Z4ZK 不萌Z4ZK

    • 我的询价

    询价列表

    暂时没有已询价产品
    inquiry icon 快捷询价
      当你希望让更多商家联系你时，可以勾选后发送询价，平台会将你的询价消息推荐给更多商家。
      个人收货地址

      编辑个人收货信息

      yanxuan

      关注「丁香通研选」

      微信及时获得商家回复，

      获得更多交易信息和保障。

      发表交流
      收藏

      关于丁香通

      公司信息

      我是买家

      我是卖家

      无忧采购 轻松科研

      丁香实验小程序

      微信关注
      丁香实验

      意见反馈