大家都说了很多方法了,我记得去以前带的师妹做细胞老是污染,后来我看她操作的时候发现她的手上戴了手链,去掉手链后就没有再污染了。你可以注意一下。
先确定是不是细菌污染。第四档一般是40X物镜,这个倍率下看到的有可能是一些细胞状态不好分泌的杂质,也有些是细胞凋亡后的碎片。这些小黑点会有布朗运动,看上去跟细菌一样会动,区别在于细菌的形态是每个点都几乎一样,而且能看到某些黑点会向某一方向移动较长的距离。碎片一般是在原地振荡。如果用CKX51这类观察用显微镜看不清,会换成镜头更好的IX71,基本上都能清楚分出来。如果确实是细菌污染,就像danielsu同学说的,换批好细胞,换掉培养基。离心是没有用的。而且受到细菌污染的细胞,状态会发生改变,实验做出来的结果不一定真实或者难于重复。特别珍贵的细胞,可以参考细胞培养的一些参考书,上面会有更详细的如何用高浓度抗生素除菌和鉴定的方法。这是个非常耗时耗力耗成本。还不如重新买一株回来。
清理你的液氮罐……液氮罐里是不是同时保存着组织样本?或者有存了很长时间的样本?这些都会污染细胞的!
如果还有细胞的话,就重新复一管吧,用新的血清。不知道你的细胞用不用消化,我曾经遇到过酶污染的情况,找到最后才找出来原因。
培养箱污染??