一、附录
1. Hank's液(无Ca2+、Mg2+)配制法
NaCl 8.0 克,KCl 0.4 克,Na2HPO4·12H2O 0.12 克,KH2HPO40.06 克,葡萄糖1.0 克,双蒸水1000 毫克,1%酚红液2 毫克
将上列成分混合后溶化,分装于500 毫升盐水瓶内,8 磅15 分钟灭菌,4 ℃冰箱保存,临用时调PH至7.3~7.6。
2. 细胞分层液配制法
9 %聚蔗糖24 份,34 %泛影葡胺10 %
混合,测比重为1.077~1.078,G5玻璃滤器过滤除菌。4 ℃冰箱保存备用。
3. 磷酸缓冲液(PB) 原液
A液 0.2 M NaH2PO4溶液,NaH2PO4 27.6 克,或NaH2PO4·2H2O 31.2 克,蒸馏水,溶解至1000 毫升
B液 0.2 M Ha2HPO4溶液,Ha2HPO4·12H2O 71.6 克,蒸馏水溶解至1000 毫升
各种不同PH值PB的配法
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PH 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0
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A液(ml) 39.0 28.0 19.0 13.0 8.5 5.5
B液(ml) 61.0 72.0 81.0 87.0 91.0 94.5
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举例 0.1 M PH7.2PB
A液28 毫升,B液72 毫升,加蒸馏水100 ml
4. 血球保存液
葡萄糖2.05 克,枸椽酸钠0.8 克,氯化钠0.42 克,蒸馏水100 毫升
将上述成分混匀,略加温使其溶解,分装小瓶(100毫升)。经10 磅、10 分钟高压灭菌。4 ℃保存备用。
RPMT-1640(FLOW公司出品)1 袋,三蒸水1000 毫升,电磁搅拌30 分钟:1N HCl 调PH7.2~7.4(约加2.5 毫升),过滤除菌,作无菌试验,4 ℃保存。
(2)不完全RPMI-1640培养液
RPMI-1640 95 毫升,0.1M丙酮酸钠 1 毫升,0.2 M谷氨酰胺 1 毫升,1 M Hepes 1 毫升,7.5 % NaHCO3 1 毫升,青霉素、链霉素(各1万单位)1 毫升
(3)完全RPMI-1640培养液
不完全1640培养液90 毫升,灭活胎牛(或新生牛)血清10 毫升
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