冻存细胞取出后37℃速溶,取15ml离心管,加入10ml含血清培养基,将冻存管中液体(通常1.5ml)也加入离心管中,习惯轻吹几下混匀,1200转常温离心5min,去掉上清,加入5ml含血清培养基,轻吹制成细胞悬液,加入到培养瓶中,即可。注意,新复苏的细胞不要经常去看去动。换液的话,只要把培养基吸出,再加入新的培养基就可以了如果你复苏的细胞长得很不均匀,可以胰酶消化下来再混匀后在重新加进去(像正常细胞一样做)
复苏后先补充培养基稀释DMSO,然后离心,去清液。补充培养基后待细胞稳定24小时,再更换培养基一次
我觉得其实细胞换液和植物换水差不多
个人觉得这个和细胞本身有关可以离心,也可以不离心,贴壁细胞我一般喜欢加到细胞冻存也10倍体积培养基,待细胞贴壁,大概也就是12小时以后换下新培养基就OK了,悬浮细胞只能离心复数,如果贴壁细胞对DMSO敏感的话,那就像悬浮细胞一样离心后加新培养基。
可以等细胞贴壁之后,用吸管把培养基吸出来,然后换成新鲜的。关于细胞培养的,来邦网也有一些,可以作为参考