标签: pEGFP-C1载体构建
本实验是以DNA为模板,在4种核苷酸存在的条件下,借助DNA聚合酶作用出现的酶促合成,依赖于在加热条件下,双链DNA解离成单链(变性),降温(复性),使引物与单链特异性结合,同时使4种核苷酸在DNA聚合酶的作用下,发生以引物为起点进行聚合的现象,使DNA链不断延伸,PCR反应进行。内容来源:中国医科大学实验指导手册。
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过表达质粒构建
过表达质粒构建时扩增目的基因总扩出不来是什么原因呢?我用了两种高保真的Tag酶都没有扩出来,做了GAPDH的阳性对照也没有扩出来,是cDNA有问题吗,可是我用的四种细胞系的混合cDNA,不至于一点都扩不出来呀????
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