佐治亚州亚特兰大一家大型公立医院隐球菌抗原侧流层析检测的评估及隐球菌抗原阳性率

Evaluation of a Cryptococcal Antigen Lateral Flow Assay and Cryptococcal Antigen Positivity at a Large Public Hospital in Atlanta, Georgia

作者信息Kristin R V Harrington, Yun F Wang, Paulina A Rebolledo, Zhiyong Liu, Qianting Yang, Russell R Kempker
PMID34189154
发布时间2021-03-12
DOI10.1093/ofid/ofab123

实验完整度

中

该研究为观察性队列研究,纳入临床样本,比较两种检测方法,包含阳性率计算、一致性分析、假阳性病例临床审查,但缺乏功能验证和机制验证。

主要模型

Grady卫生系统患者队列(HIV感染者为主) 血清样本 脑脊液样本

重点核对

样本类型:血清或脑脊液 检测方法:乳胶凝集试验与侧流层析检测 检测时间:2017年11月至2018年7月 HIV状态:79%为HIV阳性 CD4计数:中位数73 cells/mm3

摘要

背景 新型隐球菌是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者全球范围内发病和死亡的主要原因,而在美国,关于隐球菌抗原(CrAg)阳性的近期数据较少。我们旨在确定隐球菌病的发生率,并比较CrAg侧流层析检测(LFA)与乳胶凝集试验(LA)的性能。 方法 纳入2017年11月至2018年7月期间,在亚特兰大Grady卫生系统中,作为临床护理的一部分,所有血清或脑脊液(CSF)样本被送检CrAg检测的患者。计算阳性率和检测一致性。 结果 在467名患者中,共进行了557项诊断检测;其中413项为血清检测,144项为脑脊液检测。平均年龄为44岁,大多数为男性(69%),并感染HIV(79%)。24名(6.4%,95%置信区间[CI]=4.1–9.4)患者血清CrAg阳性,8名(5.8%,95% CI=2.6–11.2)个体脑脊液CrAg阳性。尽管LA和LFA在脑脊液(κ=0.71,95% CI=0.51–0.91)和血清(κ=0.93,95% CI=0.86–1.00)的总体一致性分别为高度和实质,但存在重要差异。5名患者出现影响临床护理的脑脊液LA假阳性,4名患者血清检测结果不一致。 结论 我们发现隐球菌病的比例较高,并且LA检测与LFA存在重要差异。这些发现的临床意义包括准确检测血清CrAg,以及避免对脑膜炎进行不必要的高成本药物治疗,这些药物与高不良事件发生率相关。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
确定亚特兰大Grady卫生系统内隐球菌病的发生率,并比较CrAg LFA与LA检测的性能。
核心机制
文中未明确说明
主要证据
基于467名患者的557项检测,血清CrAg阳性率6.4%,脑脊液阳性率5.8%;LA和LFA的血清一致性κ=0.93,脑脊液κ=0.71;5例CSF LA假阳性,4例血清不一致。
研究意义
LFA在检测隐球菌病方面优于LA;筛查对晚期HIV人群至关重要,可避免不必要的抗真菌治疗。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

患者队列纳入与样本收集

确定研究人群和样本类型,以评估隐球菌抗原阳性率。

纳入2017年11月至2018年7月期间,在Grady卫生系统中因临床需要送检血清或CSF CrAg的患者,收集基线特征。

2

乳胶凝集试验检测

按照标准临床实践检测血清和CSF中的隐球菌抗原。

根据制造商方案进行LA检测,血清样本用链霉蛋白酶处理,CSF样本加热处理,混合乳胶试剂后读取结果。

3

侧流层析检测

同时使用LFA检测样本,评估其性能并与LA比较。

根据制造商说明书,对所有样本进行LFA检测,加入稀释液,插入试纸条,孵育10分钟,并运行阳性和阴性对照。

4

数据收集与统计分析

比较两种检测方法的一致性,评估阳性率和差异。

从患者病历中提取人口统计学和临床数据,输入REDCap数据库,计算阳性率、kappa统计量,并对不一致案例进行临床审查。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
乳胶凝集试验----
侧流层析检测试剂盒IMMY, Inc.--
REDCap----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
患者队列
纳入标准:年龄≥18岁,样本送检CrAg;时间范围:2017年11月至2018年7月;基线特征:性别、年龄、HIV状态、CD4计数、住院状态。
阅读提示:Methods: Study Participants
乳胶凝集试验
样本预处理方法:血清用链霉蛋白酶,CSF用加热;操作方法:根据制造商方案。
阅读提示:Methods: Latex Agglutination Test
侧流层析检测
样本类型:血清或CSF;孵育时间:10分钟;对照:阳性和阴性对照。
阅读提示:Methods: Lateral Flow Assay
数据收集
数据提取:从病历;数据管理:REDCap。
阅读提示:Methods: Study Design and Data Collection
统计分析
统计指标:阳性率,kappa一致性;软件:SAS 9.4和R 3.6.1。
阅读提示:Methods: Statistical Methods