通过细胞毒性中和试验检测无症状艰难梭菌携带者粪便中的游离毒素B

Detection of Free Toxin B in the Stool of Asymptomatic Clostridioides difficile Carriers by the Cell Cytotoxicity Neutralization Assay

作者信息Lorne Schweitzer, Phillippe Gervais, Bianka Paquet-Bolduc, Vivian G Loo, Yves Longtin
PMID34113687
发布时间2021-04-25
DOI10.1093/ofid/ofab209

实验完整度

低

本研究为观察性研究,仅采用CCNA检测直肠拭子,无功能验证或机制验证,且未设置对照。

主要模型

无症状艰难梭菌携带者的直肠拭子标本

重点核对

无症状携带者定义:入院筛查PCR阳性且入院当日无腹泻 CCNA阳性判定:72小时内观察到细胞病变效应并被抗毒素B中和 样本处理:阳性拭子冻存于-80℃直至检测,同一患者多次筛查仅纳入第一次 后续CDI监测:通过回顾性图表审查确定患者是否随后发生医疗相关CDI

摘要

细胞毒性中和试验(CCNA)被认为是诊断艰难梭菌感染的金标准。我们对77名连续入院的、携带产毒艰难梭菌的无症状携带者的直肠拭子进行了CCNA检测。39%的无症状携带者标本呈阳性。因此,CCNA的特异性可能比先前认为的要低。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
无症状艰难梭菌携带者中,通过CCNA检测到游离毒素B的比例有多高,以及该检测结果是否能预测后续CDI的发生。
核心机制
文中未明确说明
主要证据
对77名NAAT阳性直肠拭子的CCNA检测显示,39%的标本细胞毒性阳性,且阳性与后续CDI无显著关联(P=.17)。
研究意义
研究强调CDI诊断不能仅基于实验室结果,需结合临床症状区分无症状定植与真实CDI,并建议进一步研究确定CCNA的临床特异性。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

样本收集与定义

识别无症状艰难梭菌携带者并收集其直肠拭子。

在2015年4月13日至9月2日间,于魁北克心肺研究所对连续入院的患者进行tcdB基因PCR筛查,定义无症状携带者为筛查阳性且入院当日无腹泻的患者,收集阳性拭子并冻存于-80℃。

2

CCNA检测游离毒素B

检测无症状携带者拭子中是否存在游离毒素B。

对77份NAAT阳性拭子进行CCNA检测,使用Vero细胞观察细胞病变效应,并通过艰难梭菌抗毒素B进行中和。

3

后续CDI监测

评估入院时CCNA阳性是否与后续医院相关性CDI发生相关。

通过回顾性审查医院感染预防与控制数据库,确定患者是否随后发生符合魁北克CDI监测项目定义的医院相关性CDI。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

检测游离毒素
检测产毒艰难梭菌

产品清单

实验环节名称品牌货号
BD Max Cdiff 检测BD--
Vero细胞系----
艰难梭菌抗毒素BBartels immunodiagnostic Supply--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
样本收集与纳入
无症状携带者定义(PCR阳性且无腹泻)、入组时间范围、单中心、多次筛查处理
阅读提示:Methods部分
CCNA检测
样品保存温度(-80℃)、Vero细胞使用、判定标准(72小时内细胞病变且被中和)、抗毒素B来源
阅读提示:Methods部分
后续CDI监测
CDI定义(魁北克监测项目)、监测方式(回顾性图表审查)、随访时间
阅读提示:Methods部分