样本库建立
获取具有地理和时间代表性的健康献血者样本,用于早期SARS-CoV-2感染的血清学评估。
从美国红十字会收集2019年12月13日至2020年7月5日的46 120份血清/血浆样本,涵盖46个州和哥伦比亚特区。
Serologic Testing of US Blood Donations to Identify Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2 and Other Coronaviruses, December 2019 to July 2020
研究包含大规模血清学筛查(46 120样本)、多种商业及实验性抗体检测(抗N、抗S、抗RBD、中和试验)以及针对其他冠状病毒的交叉反应评估,证据层级丰富。
健康献血者血清/血浆样本 美国红十字会血液捐献样本库
样本来源:美国红十字会健康献血者,覆盖46个州及哥伦比亚特区 初筛方法:罗氏Elecsys Anti-SARS-CoV-2 ECLIA(抗N总抗体,cutoff index >1.00为反应性) 确认方法:实验性抗RBD IgG检测(终点滴度≥200 U/mL为确认阳性) 补充检测:抗S ECLIA、LABScreen COVID Plus、VITROS ChLIA及中和试验(BoAB,>20%抑制为中和阳性) 时间范围:2019年12月13日至2020年7月5日
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
获取具有地理和时间代表性的健康献血者样本,用于早期SARS-CoV-2感染的血清学评估。
从美国红十字会收集2019年12月13日至2020年7月5日的46 120份血清/血浆样本,涵盖46个州和哥伦比亚特区。
识别可能感染SARS-CoV-2的样本。
使用罗氏Elecsys Anti-SARS-CoV-2 ECLIA检测总抗N抗体。
验证初筛阳性样本,并评估不同抗S和抗N靶点的反应性。
对91份有足够体积的初筛阳性样本,使用Elecsys Anti-SARS-CoV-2 S ECLIA、LABScreen COVID Plus(检测S、S1、S2、RBD、N及常见感冒冠状病毒等)和VITROS ChLIA进行补充检测。
通过高特异性实验确认SARS-CoV-2感染。
使用实验性抗RBD IgG检测(武汉株)对初筛阳性样本进行确认。
评估抗体功能,区分病毒株,并进一步支持感染。
使用BoAB试验检测SARS-CoV-2刺突(武汉株和Delta株)的中和活性。
排除其他人类冠状病毒对SARS-CoV-2抗体检测的干扰。
使用LABScreen COVID Plus检测55份确认阳性样本对4种常见感冒冠状病毒(229E、HKU1、NL63、OC43)、MERS-CoV和SARS-CoV的S1抗体反应。
评估组间差异和相关趋势。
使用χ2检验、Pearson相关、Wilcoxon秩和检验等分析人口统计学特征、不同时间段的反应性变化及不同检测之间的相关性。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 抗体筛查 | Elecsys抗SARS-CoV-2电化学发光免疫分析 | Roche Diagnostics | 09203095190 |
| 抗体检测 | Elecsys抗SARS-CoV-2 S电化学发光免疫分析 | Roche Diagnostics | 09289267190 |
| 多重抗体检测 | LABScreen COVID Plus检测 | One Lambda | -- |
| 抗体确认检测 | VITROS抗SARS-CoV-2 N化学发光免疫分析 | Ortho-Clinical Diagnostics | 6199975 |
| VITROS抗SARS-CoV-2 S1化学发光免疫分析 | Ortho-Clinical Diagnostics | 6199922 |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 样本采集 | 样本来源、样本类型、采集时间、覆盖地理区域、献血者健康状况 阅读提示:Methods: Sample Repository |
| 初筛 | 检测平台(cobas e601)、试剂(Elecsys Anti-SARS-CoV-2 ECLIA)、阳性阈值(cutoff index>1.00) 阅读提示:Methods: SARS-CoV-2 N Antibody Screening |
| 补充检测 | 检测试剂(Elecsys S ECLIA、LABScreen COVID Plus、VITROS ChLIA)、阳性判定标准 阅读提示:Methods: Supplemental SARS-CoV-2 Antibody Testing |
| 确认检测 | 抗RBD实验方法、终点滴度阈值(≥200 U/mL)、实验室(Emory University) 阅读提示:Methods: Confirmatory SARS-CoV-2 Antibody Testing |
| 中和试验 | BoAB试验方法、中和阳性阈值(>20%抑制)、病毒株(Wuhan、Delta) 阅读提示:Methods: Neutralization Antibody Testing |