NanoTag Biotechnologies，2015年在哥廷根成立，专注于生产生化和荧光应用的单域抗体（纳米抗体/VHH抗体）和试剂。可稳定提供荧光标记的单域抗体，新型标签“ALFA”单域抗体及其纯化系统，用于IP的Selector resins，以满足各种实验的要求。纳米抗体特别适用于高分辨率显微镜成像。

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1、FluoTag —— 带荧光标签的单域抗体，每个单域抗体可偶联1个，2个或4个荧光标签，用于高分辨率显微镜成像。

COS 细胞线粒体表达标记物Tom70-mNeonGreen。使用FluoTag-X2 anti-mNeonGreen AbberiorSTAR RED (紫)对细胞进行染色，细胞核用 DAPI（蓝）染色。

 

2、新型标签 —— ALFA系统

ALFA 标签是一种新型、合理设计的表位标签 (SRLEEELRRRLTE)，它形成一个小而稳定的α-螺旋，无论其在原核和真核宿主中的靶蛋白上的位置如何，该螺旋都具有功能。侧翼脯氨酸残基不是识别序列的一部分，但可能有助于标签与目标蛋白质的空间分离。

2.1 用于成像的ALFA系统：

Nanotag开发了一种以 ~26 pM 亲和力结合 ALFA 标签的单域抗体，它不仅非常适合超分辨率显微镜、免疫沉淀和蛋白质印迹，而且还可以检测活细胞内的蛋白质。这种纳米抗体几乎可以与所有种类的荧光团、酶或其他生物分子结合。

2.2 用于免疫沉淀的ALFA系统：

ALFA Selector ST:可在酸性或变性条件下洗脱，为高效下拉ALFA标记的目标蛋白而设计。

ALFA Selector PE:针对胜利条件下的洗脱进行优化。

将在 PBS 中制备的 HeLa 裂解物与重组纯化的 ALFA 标记的 GFP 底物（右泳道）混合。裂解物/底物混合物与 ALFA SelectorPE（左图）或 ALFA SelectorST（右图）一起孵育。用 PBS 洗涤后，结合的蛋白质用 200 µM ALFA 肽、甘氨酸 pH2.2 或 SDS 样品缓冲液 (SDS) 洗脱。使用 ALFA SelectorPE 时，天然条件下的肽洗脱是有效的。通过用甘氨酸或 SDS 样品缓冲液洗脱，可以从两种 ALFA Selector 树脂中回收目标蛋白。 

 

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