质粒DNA提取试剂盒全规格指南
28 人阅读发布时间：2026-08-05 17:30
YALEPIC® 质粒提取产品线
质粒DNA提取试剂盒全规格指南
小提·中提·大提·超大量·无内毒素，11款产品一次选对
YALEPIC® 雅礼生物 | 碱裂解 + 硅膜吸附 + 可视化指示 | 国家高新技术企业
|
本文核心要点
产品定位：YALEPIC® 质粒DNA提取试剂盒系列覆盖1~5ml小提、5~50ml中提、100~300ml大提、100~500ml超大量提取四大规格梯度，含超纯与无内毒素两大纯度等级，共11款产品。
核心技术：优化碱裂解法结合独特硅基质膜吸附技术，内置蓝黄/蓝色指示剂实现操作全程可视化，精准去除基因组DNA、RNA、杂蛋白及内毒素。
关键参数：小提20~30分钟、大提45~50分钟完成；单柱载量最高45μg（小提）至3mg（大提）；OD260/280=1.8~2.0；无内毒素PLUS版内毒素残留<0.1 EU/μg。
储运与资质：全部组分常温运输、10~30℃室温保存，保质期12~18个月；另有磁珠法质粒小提适配自动化高通量平台。 |
质粒提取四大痛点：选错试剂盒比操作失误更致命
① 基因组DNA污染
碱裂解依赖精确pH控制，裂解超5分钟或中和不均即导致gDNA残留。某基因治疗公司反馈：普通试剂盒约20%~30%批次存在gDNA污染，直接影响转染成功率。 |
|
② 内毒素残留致命
内毒素（脂多糖LPS）微量残留即显著降低敏感细胞转染效率、激活免疫反应，动物实验可致发热休克。2023年《Nature Biotechnology》研究：内毒素每降低一个数量级，HEK293转染效率提升15%~30%。 |
|
③ 规格不匹配
小提做大量=批间一致性差、吸附柱饱和产量低；大提做小量=试剂浪费。选对规格是质粒提取实验成功的第一步。 |
|
④ 操作不可视
无法判断裂解与中和是否完全，新手只能凭手感操作，批次质量波动大。 |
|
技术原理：碱裂解 + 硅膜吸附 + 可视化指示
五步操作流程
碱裂解法自1979年由Birnboim和Doly发明，至今仍是质粒提取的黄金标准，核心是利用pH变化选择性分离质粒DNA与基因组DNA。YALEPIC® 在此基础上做了三大关键优化：预混蓝黄/蓝色指示剂、进口特制硅基质膜（载量45μg~3mg）、无内毒素系列配专用内毒素去除Buffer（残留<0.1 EU/μg）。 |
| 步骤 |
操作 |
Buffer / 关键点 |
| 1. 菌体重悬 |
PA Buffer重悬菌体 |
含RNase A去除RNA |
| 2. 碱裂解 |
PB Buffer（蓝色）裂解 |
溶液变蓝=裂解完全 |
| 3. 中和沉淀 |
ER/PM2 Buffer中和 |
蓝色消失=中和到位 |
| 4. 硅膜结合 |
YS Buffer高盐低pH条件下 |
质粒DNA特异性结合硅膜 |
| 5. 洗脱回收 |
YEB Buffer洗脱 |
获得高纯度质粒DNA |
六大核心优势
① 蓝黄指示剂可视化
小提预混蓝黄双指示剂，大提含蓝色指示剂。裂解变蓝=裂解完全，中和蓝色消失=中和到位，颜色变化即操作指南，新手也能一次成功。 |
|
② 20~50分钟快速提取
小提全程20~30分钟，大提45~50分钟，相比传统酚仿法（2~3小时）效率提升3~6倍。上午提取、下午转染，当天出结果。 |
|
③ 超高产量与纯度
小提单柱最高45μg，大提产量2~3mg，OD260/280=1.8~2.0。有效去除gDNA、RNA、杂蛋白，可直接用于酶切、测序、PCR及细胞转染。 |
|
④ 无内毒素达转染级
专用内毒素去除Buffer柱上去除内毒素，PLUS版残留<0.1 EU/μg，去除率>99%，满足HEK293/CHO/HeLa转染、CRISPR编辑、慢病毒包装及动物注射。 |
|
⑤ 11款全规格覆盖
从1ml小提到500ml超大量，从超纯到无内毒素，从柱式到磁珠法。小提¥450起、大提¥650起，性价比优于进口品牌，按需选型不浪费。 |
|
⑥ 常温储运无需冷链
全部组分常温运输，10~30℃室温保存，保质期12~18个月。无需冷库，节省冷链费用50%~80%。 |
|
全规格产品选型指南（11款产品一览）
选型总览
按菌液量分为小提（1~5ml）、中提（5~50ml）、大提（100~300ml）、超大量（100~500ml）四个梯度；按纯度等级分为超纯（常规分子生物学）与无内毒素（转染级）；另有磁珠法小提适配自动化平台。 |
| 产品名称 |
货号 |
菌液量 |
内毒素 |
定位 |
| 超纯质粒小提（1-5ml） |
YC47002-200 |
1~5ml |
— |
性价比最高，¥450/200T |
| 无内毒素质粒小提（1-5ml） |
YC47004 |
1~5ml |
<1 EU/μg |
转染级小提 |
| 超纯质粒中提（1-15ml） |
YC47006 |
1~15ml |
— |
常规中量制备 |
| 无内毒素质粒中提（5-15ml） |
YC47007 |
5~15ml |
<1 EU/μg |
中量转染级 |
| 无内毒素质粒中提（30-50ml） |
YC47008 |
30~50ml |
<1 EU/μg |
高拷贝大批量 |
| 超纯质粒大提（100-300ml） |
YC47010-10 |
100~300ml |
— |
常规大提 |
| 无内毒素质粒大提（100-300ml） |
YC47013-10 |
100~300ml |
<1 EU/μg |
¥650/10T，转染级 |
| 无内毒素质粒大提PLUS（100-300ml） |
YC47015-10 |
100~300ml |
<0.1 EU/μg |
超低内毒素，45min |
| 磁珠法质粒小提 |
YM49003 |
1~5ml |
— |
适配自动化96孔板 |
| 无内毒素质粒超大量（100-500ml） |
YC47017-10 |
100~500ml |
<1 EU/μg |
基因治疗级产量 |
| 无内毒素质粒超大量PLUS（100-500ml） |
YC47018-10 |
100~500ml |
<0.1 EU/μg |
超低内毒素大产量 |
按应用场景选型：四类典型需求
① 分子克隆/测序/PCR
超纯质粒小提（YC47002）：1~5ml，¥450/200T，性价比最高，日常克隆筛选用它。 |
|
② 细胞转染/CRISPR
无内毒素大提（YC47013）：100~300ml，¥650/10T，转染级纯度，适配HEK293/CHO/HeLa。 |
|
③ 动物实验/基因治疗
无内毒素大提PLUS（YC47015）：<0.1 EU/μg超低内毒素，满足动物体内注射。 |
|
④ 高通量自动化
磁珠法质粒小提（YM49003）：适配自动化工作站96孔板，中高通量。 |
|
超纯 vs 无内毒素：什么时候必须选无内毒素？
| 对比维度 |
超纯系列 |
无内毒素系列 |
| 内毒素残留 |
未专门去除 |
<1（普通）/ <0.1 EU/μg（PLUS） |
| 适用下游实验 |
酶切、PCR、测序、转化 |
上述全部 + 细胞转染、动物实验 |
| 细胞转染 |
不推荐 |
推荐 |
| 动物体内注射 |
禁止 |
必须（建议PLUS版） |
| 价格 |
较低 |
略高（多内毒素去除步骤） |
| 选择建议 |
日常分子克隆、质粒鉴定 |
细胞转染、基因治疗、动物实验 |
选型结论
一句话总结：若只做酶切、PCR、测序等体外分子生物学实验，选超纯系列；若涉及细胞转染、CRISPR编辑、病毒包装、动物注射等体内实验，必须选无内毒素系列（动物实验建议PLUS版，内毒素<0.1 EU/μg）。 |
硅膜柱式法 vs 磁珠法 vs 传统酚仿法
| 对比维度 |
YALEPIC® 柱式法 |
YALEPIC® 磁珠法 |
传统酚仿法 |
| 原理 |
碱裂解+硅膜吸附 |
碱裂解+磁珠结合 |
酚仿萃取+乙醇沉淀 |
| 耗时 |
20~50min |
约30min |
2~3h |
| 纯度（OD260/280） |
1.8~2.0 |
1.8~2.0 |
1.6~1.9 |
| 有毒试剂 |
无 |
无 |
苯酚/仿 |
| 可视化指示剂 |
蓝黄/蓝色 |
无 |
无 |
| 自动化适配 |
需离心 |
完美适配 |
无法自动化 |
| 内毒素去除 |
可柱上去除 |
需额外步骤 |
无法去除 |
| 通量 |
低~中 |
中~高（96孔板） |
低 |
| 单次成本 |
低（¥2.25/次起） |
中 |
最低（试剂自配） |
| 批间一致性 |
高 |
高 |
低（CV 15%~25%） |
常见问题 FAQ
| Q1：小提、中提、大提怎么选？菌液量多少合适？ |
| 按下游实验需求选择：日常克隆/PCR/测序选小提（1~5ml），产量最高45μg足够；中量制备选中提（5~50ml）；细胞转染/病毒包装选大提（100~300ml），产量2~3mg；基因治疗动物实验选超大量（100~500ml）。低拷贝质粒建议适当增加菌液量。 |
| Q2：什么时候必须用无内毒素试剂盒？ |
| 涉及细胞转染（HEK293/CHO/HeLa等）、CRISPR基因编辑、慢病毒/AAV包装、动物体内注射等体内实验时必须使用无内毒素质粒。内毒素会降低转染效率、激活免疫反应、引发细胞凋亡和动物发热休克。仅做酶切/PCR/测序等体外实验可用超纯系列。 |
| Q3：普通无内毒素版和PLUS版有什么区别？ |
| 普通无内毒素版内毒素残留<1 EU/μg，满足大多数细胞转染需求；PLUS版采用新型内毒素去除液YEB，残留低至<0.1 EU/μg，适合对内毒素极度敏感的细胞系（如原代细胞、干细胞）和动物体内注射实验。 |
| Q4：蓝黄指示剂怎么看？颜色异常怎么办？ |
| 小提试剂盒：裂解时溶液变蓝=裂解完全，中和后蓝色消失变黄=中和到位；大提试剂盒：裂解时变蓝，中和后蓝色消失。若裂解液不变蓝，可能菌液过量或缓冲液pH异常，建议减少菌液量并确保缓冲液无沉淀（如有沉淀37℃水浴溶解）。 |
| Q5：质粒产量低怎么办？ |
| 常见原因：①细菌培养时间过长（>16h）致质粒丢失——建议12~16h收集；②菌液OD600过低——确保达2.0~4.0；③低拷贝质粒——增加菌液量并按比例扩大试剂用量；④裂解不充分——确保裂解时间≥3min但≤5min，充分混匀无菌块；⑤洗脱温度低——使用60℃预热Elution Buffer可提高得率。 |
| Q6：可以提取大质粒（>10kb）或BAC/PAC吗？ |
| <20kb的质粒提取效果最佳。对于>10kb的大质粒，建议增加菌液量（5~10ml）、延长吸附和洗脱时间、使用60℃预热洗脱液、避免剧烈震荡防止断裂。对于BAC/PAC（>20kb），硅胶膜吸附效率下降且可能造成剪切损伤，建议选用专用大质粒提取试剂盒。 |
| Q7：转染后细胞死亡率高，是质粒纯度问题吗？ |
| 可能原因：①内毒素残留超标（最常见）——请使用无内毒素试剂盒；②质粒中残留乙醇——确保最后一次洗涤后空甩5min去除乙醇；③OD260/280偏离1.8~2.0——重新提取；④转染试剂本身毒性。建议先检测内毒素水平和OD比值。 |
| Q8：试剂盒常温保存有效期多久？RNase A怎么处理？ |
| 全部组分10~30℃常温保存，未开封保质期12~18个月。RNase A需加入Buffer PA中混匀，加入后2~8℃保存，6个月内用完。若室温常超30℃，建议RNase A单独4℃保存。Buffer PB如有沉淀，37℃水浴溶解后使用，不影响效果。 |
选对质粒提取试剂盒，实验事半功倍
YALEPIC® 11款质粒提取产品全规格覆盖 | 蓝黄指示剂可视化 | 常温储运
从1ml小提到500ml超大量，从超纯到无内毒素转染级。热销：超纯小提 YC47002-200｜无内毒素大提 YC47013-10｜磁珠法小提 YM49003 |
| 相关关键词：质粒DNA提取试剂盒, 无内毒素质粒提取, 质粒大提试剂盒, 质粒小提试剂盒, 碱裂解法, 质粒DNA纯化, YC47002, YC47013, YC47015, 磁珠法质粒提取, 质粒提取内毒素去除, 转染级质粒, YALEPIC, 雅礼生物 |
