一盒搞定6类样本!20分钟免酚仿,基因组DNA最高50kb
30 人阅读发布时间:2026-08-05 17:09
雅礼生物 · 通用型基因组DNA纯化方案
一盒搞定6类样本!20分钟免酚仿,基因组DNA最高50kb YALEPIC® 通用型基因组DNA提取试剂盒(货号YC22016,硅胶膜离心柱法)
动物组织 · 血液 · 细胞 · 细菌 · 真菌 · 酵母 · 一盒通用 · ¥300/50T · 室温保存18个月
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要点摘要 核心问题:血液、组织、细胞、细菌、真菌、酵母等6类样本,传统提取需酚仿抽提或盐析,耗时3-4小时、有毒试剂风险高、不同样本不通用,实验室被迫囤积多种试剂盒。 技术方案:优化的硅胶膜离心柱法:高盐低pH下DNA选择性吸附硅胶膜,蛋白质/RNA等杂质被高效洗脱,低盐高pH下洗脱回收。全程15-20分钟,无需酚/仿、无乙醇沉淀,操作安全。 质量指标:纯化DNA分子量最高50kb,完整性佳;OD260/280稳定在1.7-1.9;产物可直接用于PCR、qPCR、酶切、Southern印迹、NGS文库构建。 规格与储运:货号YC22016,50T规格,目录价¥300(约¥6/样本)。室温10-30℃保存与运输,有效期18个月,无需冷链。 |
传统基因组DNA提取的四大痛点
① 酚仿有毒,操作风险高 酚仿抽提需在通风橱操作:酚腐蚀皮肤、仿具神经毒性,废液处理成本高,且残留有机溶剂会抑制下游酶切和PCR反应。 |
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② 耗时长,通量低 酚仿法从裂解到醇沉淀全程3-4小时;盐析法也需多次离心和转移上清,一天处理不了几个样本,实验进度严重受限。 |
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③ 样本类型多,试剂盒不通用 血液、组织、细菌、酵母、细胞……不同样本需不同裂解方案,实验室不得不囤多种试剂盒,占用预算也增加管理负担。 |
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④ DNA质量参差不齐 杂质残留(蛋白、RNA、脂类、盐离子)导致OD260/280偏离理想值,下游PCR抑制、酶切失败、NGS文库质量差等问题频发。 |
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硅胶膜离心柱法:三步完成基因组DNA纯化
① 裂解 蛋白酶K + YGT Buffer,56℃孵育裂解细胞,温和释放核酸,避免机械剪切。 |
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② 结合·洗涤 裂解液上柱,DNA在离序盐条件下选择性结合硅胶膜,GA/GB缓冲液洗去蛋白、RNA等杂质。 |
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③ 洗脱 YGE Buffer低盐条件下洗脱,获得高纯度基因组DNA,即取即用。 |
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| 技术原理:高盐低pH条件下,DNA选择性地吸附于硅胶膜表面,蛋白质、RNA等杂质被高效洗脱;最终在低盐高pH条件下将纯化DNA洗脱回收。相比传统酚仿法和盐析法,全程无有机溶剂、无乙醇沉淀步骤,操作简单安全,且DNA完整性更好。 |
| 全程仅需15-20分钟,安全无毒,无需特殊设备,一台离心机即可完成。 |
YALEPIC® 通用型基因组DNA提取的六大核心优势
① 通吃6类样本,一盒解决 兼容动物组织、全血、培养细胞、细菌、真菌、酵母,统一裂解体系免去多试剂盒切换的烦恼,节省预算和管理成本。 |
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② 15-20分钟极速提取 从样本裂解到DNA回收全程不超过20分钟,通量远超传统酚仿法(3-4小时),一天可轻松处理数十个样本。 |
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③ 50kb大片段DNA 温和裂解减少机械剪切,纯化DNA分子量最高可达50kb,片段完整性高,满足酶切、Southern印迹、长片段PCR等需求。 |
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④ 零有机溶剂,安全环保 全程无需酚、仿、β-嶏基乙醇等有毒试剂,无乙醇沉淀步骤,废液处理简单,实验室安全合规。 |
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⑤ 高纯度,下游无忧 最大限度去除RNA、杂蛋白、脂类及抑制剂,OD260/280稳定在1.7-1.9,PCR、qPCR、酶切、NGS建库均可靠。 |
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⑥ 室温保存18个月 10-30℃室温储存与运输,无需冷链,有效期长达18个月;蛋白酶K按说明书分装冻存即可,实验室管理轻松。 |
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适用样本范围与参考产量
① 抗凝全血 无核血≤200μl · 有核血5-20μl |
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| 样本类型 |
推荐投入量 |
参考DNA产量 |
OD260/280 |
| 人抗凝全血(健康) |
200 μl |
3-6 μg |
1.7-1.9 |
| 动物组织(肝脏) |
25 mg |
10-30 μg |
1.7-1.9 |
| 培养细胞(HEK293) |
5×10⁶ 个 |
15-40 μg |
1.7-1.9 |
| 细菌(大肠杆菌) |
3×10⁹ 个 |
5-15 μg |
1.7-1.9 |
| 注:产量因样本来源、保存方式和操作手法而异,以上数据仅供参考。建议首次实验前优化裂解条件。 |
产品组分与订购信息
| 参数 |
规格 |
| 产品货号 |
YC22016 |
| 提取次数 |
50T |
| 目录价 |
¥300.00 |
| 保存条件 |
室温10-30℃,有效期18个月;蛋白酶K建议分装冻存 |
| 单次成本 |
约¥6/样本 |
| 序号 |
产品组分 |
规格(50T) |
用途说明 |
| ① |
YGT Buffer(裂解缓冲液) |
15 ml |
细胞裂解,56℃配合蛋白酶K使用 |
| ② |
YG Buffer(结合缓冲液) |
15 ml |
调节DNA结合硅胶膜条件 |
| ③ |
Wash Buffer GA(洗涤液A) |
13 ml |
首次使用前加无水乙醇 |
| ④ |
Wash Buffer GB(洗涤液B) |
16 ml |
首次使用前加无水乙醇 |
| ⑤ |
YGE Buffer(洗脱缓冲液) |
15 ml |
低盐洗脱回收纯化DNA |
| ⑥ |
Proteinase K(蛋白酶K) |
1.2 ml |
56℃裂解消化蛋白 |
| ⑦ |
Pure Columns YM + 收集管 |
50 T |
硅胶膜离心吸附柱+收集管 |
YALEPIC® 硅胶膜柱法 vs 传统方法横向对比
| 对比维度 |
酚仿法 |
盐析法 |
YALEPIC® 硅胶膜柱法 |
| 操作时间 |
3-4 小时 |
1-2 小时 |
15-20 分钟 |
| 有机溶剂 |
酚+仿 |
无需 |
完全无需 |
| DNA片段完整性 |
较好 |
一般 |
最高50kb |
| 样本通用性 |
需分别优化 |
仅限部分样本 |
6类样本通用 |
| 纯度(OD260/280) |
1.6-1.8 |
易偏低 |
1.7-1.9 |
| 自动化兼容 |
不可 |
困难 |
柱式兼容 |
| 安全合规 |
需通风橱+废液处理 |
较安全 |
安全环保 |
学术发表与品牌资质
| Virology Journal (2024), 21:230 |
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| 学术背书:本试剂盒已发表于 Virology Journal (2024), 21:230 —— 猪圆环病毒流行病学调查中采用本试剂盒提取基因组DNA,实验数据公开发表,品质可追溯。 |
| 下游应用一览:PCR扩增 · Real-Time PCR(qPCR) · 限制性内切酶酶切 · Southern印迹 · NGS文库构建 · 基因分型 · 法医鉴定 · 遗传病检测 |
常见问题 FAQ(6条高频问答)
| 这款试剂盒能处理哪些样本?植物组织能用吗? |
| 本试剂盒为“通用型”产品,适用于动物组织、全血、培养细胞、细菌、真菌、酵母等6类样本。植物组织含有大量多糖多酚,会干扰硅胶膜吸附,不建议使用;FFPE样本因甲醛交联也需专用试剂盒。 |
| 为什么提取的DNA产量偏低甚至检测不到? |
| 常见原因:①样本本身DNA含量低或保存不当导致降解;②裂解不充分——组织块过大或蛋白酶K孵育时间不足,建议延长56℃孵育时间;③Wash Buffer忘记添加无水乙醇(新手最常见错误);④洗脱不充分——建议将洗脱液预热至60-70℃滴加在膜中央,或进行二次洗脱。 |
| OD260/280偏低或偏高怎么解决? |
| 偏低(<1.7)说明有蛋白质残留——确保蛋白酶K足量反应、洗涤后彻底干燥吸附柱去除乙醇。偏高(>1.9)说明有RNA残留——可在加蛋白酶K前加入4 μl RNase A(100 mg/ml)室温处理5分钟。 |
| 电泳发现DNA条带拖尾弥散,是降解了吗? |
| 可能是降解。避免方法:①使用新鲜采集或妥善冻存的样本,切忌反复冻融;②确保组织充分研磨、裂解液与样本混合均匀;③提取后DNA分装保存于-20℃。 |
| 试剂盒的保存条件是什么?能放多久? |
| 室温(10-30℃)储存和运输,有效期长达18个月。蛋白酶K建议按说明书分装冻存,避免反复冻融。无需特殊低温保存,实验室日常取用非常方便。 |
| 提取的DNA可以用于哪些下游实验? |
| 可广泛应用于PCR、Real-Time PCR(qPCR)、限制性酶切、Southern印迹杂交、NGS文库构建等。高纯度DNA(OD260/280在1.7-1.9之间)确保下游实验结果可靠。 |
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