百会新知切片透明化技术对比整脑透明化常见问题问答

Q1：切片透明化和整脑透明化，在透明化效果上有什么核心差别？

A： 小鼠大脑属于厘米级组织，如果直接做整脑透明化，透明试剂由外向内渗透，会天然形成梯度差异，脑组织深部散射强、折射率不均匀，容易出现深层信号弱、背景浑浊的问题。即便采取改良手段，也很难彻底规避这一物理层面的局限。

百会新知的方案是将全脑切成 300 μm 厚片后再开展透明化。脑片厚度仅为全脑的 1/30‑1/50，试剂渗透快速且均匀，几乎不存在深部散射问题，透明效果一致性好，成像信噪比高、伪影少，最终的数据质量更稳定。

Q2：切片过程会产生样本损耗，这个问题影响大吗？

A： 切片产生片间损耗是客观存在的。目前适配鼠脑的振动切片技术已经非常成熟，百会新知片间损耗小于 5 μm。神经元本身大小约 10 μm，配合 300 μm 厚切片方案，损耗占比不足 1.7%；反观传统薄切片技术切的是几十微米的薄片，同样 5 μm 损耗，占比可以达到 20%左右。

同时百会新知平台配套完整 AI 算法，对片间丢失的神经元形态、走向做补偿校正，保障神经元统计结果的准确度。

Q3：两种技术的样本处理耗时差别怎么样？

A： 整脑透明化受限于试剂渗透慢的固有短板，常规处理周期需要 15 天以上；就算使用电场辅助加速手段，单份样本也要 5‑7 天。并且实验条件严苛，温度、震荡速度、换液频率稍有偏差，就会造成透明失败或者透明均匀度差。

切片透明化依托 300 μm 薄层样本，试剂渗透动力学更稳定，透明、染色、漂洗整套流程时间大幅缩短，还能规避长时间浸泡带来的组织形变、荧光淬灭风险。百会新知的成像服务可以做到十天交付，整体处理效率更高。

Q4：切片透明化与整脑透明化，成像质量差距体现在哪里？

A： 光散射、光路传播距离是决定成像信噪比与分辨率的关键。 整脑成像时，光线需要穿透数毫米完整脑组织，光散射、光吸收持续发生，深部折射率不均，背景噪声抬升。观察树突棘、突触末梢、细小胶质突起这类微米、亚微米精细结构时，容易出现结构模糊、细节丢失、信号失真。

切片透明化把光路传播距离限制在 300 μm 以内，极大抑制光散射干扰，横向、轴向分辨率表现更好，可以清晰分辨树突棘、突触位点、细胞骨架等微观结构，适合精细结构观测。

Q5：切片成像之后需要拼接重构，拼接会不会难度大、拉低数据质量？

A： 不需要担心这个问题。平台依托自研自动化软件搭配 AI 算法，已经实现自动化片间拼接与三维重构；加上前期获得高质量、高均一性的脑片成像数据，给拼接重构打下良好基础，可以产出满足论文要求的分析数据集。我们公司自成立以来已经给上千个课题组、30多个院士团队提供了成像服务，已有近百篇顶刊发表，我们公司的厚切片透明化技术越来越成为脑科学家们的shou选。

Q6：综合来看，切片透明化和整脑透明化该怎么选择？

A： 很多人直观认为整脑透明化省去切片步骤，流程简单、速度更快，但实际情况恰恰相反。 整脑透明化受物理渗透限制，存在深部成像差、处理周期长、实验容错率低等固有短板。百会新知的厚切片‑透明化方案从物理根源上规避大块组织透明化难题，成像信噪比高、细节表现好、实验周期短，配套 AI 补偿、自动拼接重构能力，整套服务可实现十天交付，能够为科研工作者提供更加稳定可靠的介观全脑成像解决方案。